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Spectroscopie de corrélation croisée de fluorescence bicolore pour étudier l’interaction protéine-protéine et la dynamique des protéines dans les cellules vivantes
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Dual-Color Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy to Study Protein-Protein Interaction and Protein Dynamics in Live Cells
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Spectroscopie de corrélation croisée de fluorescence bicolore pour étudier l’interaction protéine-protéine et la dynamique des protéines dans les cellules vivantes

DOI:
10.3791/62954-v

•

14:12 min

•

December 11, 2021

•

, , , , , ,
1Rudolf Virchow Center for Integrative and Translation Bioimaging,Julius-Maximilian University Wuerzburg, 2Max Delbrück Center for Molecular Medicine, Berlin

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:09Sample Preparation
  • 04:34Calibration Measurements
  • 05:58Live Cell Measurements
  • 06:52Data Export
  • 07:23Calibration Measurements
  • 09:20Live Cell Experiments
  • 11:20Results
  • 13:17Conclusion

Summary

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Nous présentons un protocole expérimental et un flux de travail d’analyse de données pour effectuer une spectroscopie de corrélation croisée de fluorescence bicolore (FCCS) de cellules vivantes combinée à un transfert d’énergie de résonance de Förster (FRET) pour étudier la dynamique des récepteurs membranaires dans les cellules vivantes à l’aide de techniques modernes de marquage par fluorescence.

Tags

Fluorescence Correlation SpectroscopyCross-correlation SpectroscopyFRETG Protein-coupled ReceptorsBeta-2 Adrenergic ReceptorsSphingolipid ReceptorsProtein-protein InteractionProtein DynamicsLive CellsCell CultureTransfectionSNAP-tagFluorescence AnisotropyTranslational DiffusionRotational Diffusion

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