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Spettroscopia di correlazione incrociata a fluorescenza a doppio colore per studiare l'interazione proteina-proteina e la dinamica proteica nelle cellule vive
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Dual-Color Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy to Study Protein-Protein Interaction and Protein Dynamics in Live Cells
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Spettroscopia di correlazione incrociata a fluorescenza a doppio colore per studiare l'interazione proteina-proteina e la dinamica proteica nelle cellule vive

DOI:
10.3791/62954-v

•

14:12 min

•

December 11, 2021

•

, , , , , ,
1Rudolf Virchow Center for Integrative and Translation Bioimaging,Julius-Maximilian University Wuerzburg, 2Max Delbrück Center for Molecular Medicine, Berlin

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:09Sample Preparation
  • 04:34Calibration Measurements
  • 05:58Live Cell Measurements
  • 06:52Data Export
  • 07:23Calibration Measurements
  • 09:20Live Cell Experiments
  • 11:20Results
  • 13:17Conclusion

Summary

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Presentiamo un protocollo sperimentale e un flusso di lavoro di analisi dei dati per eseguire la spettroscopia di correlazione incrociata a fluorescenza a doppio colore (FCCS) combinata con il trasferimento di energia di risonanza di Förster (FRET) per studiare la dinamica del recettore di membrana nelle cellule vive utilizzando le moderne tecniche di etichettatura a fluorescenza.

Tags

Fluorescence Correlation SpectroscopyCross-correlation SpectroscopyFRETG Protein-coupled ReceptorsBeta-2 Adrenergic ReceptorsSphingolipid ReceptorsProtein-protein InteractionProtein DynamicsLive CellsCell CultureTransfectionSNAP-tagFluorescence AnisotropyTranslational DiffusionRotational Diffusion

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