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Medição da Composição do Complexo de Sinalização e Processamento de Indução de Morte CD95 de Procaspase-8 neste Complexo
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Measuring Composition of CD95 Death-Inducing Signaling Complex and Processing of Procaspase-8 in this Complex
DOI:

07:17 min

August 02, 2021

,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:44Preparing Cells and CD95L Stimulation
  • 01:11Cell Harvest and Lysis
  • 02:29Immunoprecipitation
  • 03:28Western Blot
  • 04:21Western Blot Detection
  • 05:05Analysis of CD95 DISC Formation in HeLa-CD95 cells, c-FLIPL-overexpressing HeLa-CD95 cells, and Primary T Cells
  • 06:25Conclusion

Summary

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Aqui, é apresentado um fluxo de trabalho experimental que permite a detecção do processamento caspase-8 diretamente no complexo de sinalização indutor de morte (DISC) e determina a composição desse complexo. Essa metodologia possui amplas aplicações, desde a desvendação dos mecanismos moleculares das vias de morte celular até a modelagem dinâmica das redes de apoptose.

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