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Monitorando a Dinâmica da Interação Proteína-RNA In Vivo em Alta Resolução Temporal Usando χCRAC
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Monitoring Protein-RNA Interaction Dynamics In Vivo at High Temporal Resolution Using χCRAC
DOI:

09:15 min

May 09, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:58UV Crosslinking and Lysate Production
  • 03:18Elution and SDS-PAGE
  • 05:24PCR and Gel Extraction
  • 07:06Results: Temporal Binding of Nrd1 to its Targets
  • 08:47Conclusion

Summary

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A reticulação cinética e análise de cDNA é um método que permite investigar a dinâmica das interações proteína-RNA em células vivas em alta resolução temporal. Aqui, o protocolo é descrito em detalhes, incluindo o crescimento de células de levedura, reticulação UV, colheita, purificação de proteínas e etapas de preparação da biblioteca de sequenciamento de próxima geração.

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