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생화학
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プロテオミクス施設提出のためのTMTサンプル調製とその後のデータ分析
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문
생화학
TMT Sample Preparation for Proteomics Facility Submission and Subsequent Data Analysis
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Click here for the English version.
プロテオミクス施設提出のためのTMTサンプル調製とその後のデータ分析
DOI:
10.3791/60970-v
•
07:44 min
•
June 08, 2020
•
Silveli Suzuki-Hatano
,
Ang-Chen Tsai
,
Audrey Daugherty
,
Christina A. Pacak
1
Department of Pediatrics
,
University of Florida
Chapters
00:04
Introduction
00:31
Protein Extraction
01:40
Reducing/Alkylating Reagent Treatment
02:39
Methanol/Chloroform Precipitation
04:20
Protein Digestion
04:56
Peptide Labeling
05:57
Results: Representative Protein Quantification and Volcano Plot and Protein Analysis through Evolutionary Relationships (PANTHER) Analyses
07:04
Conclusion
Summary
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タンパク質抽出、定量、沈殿、消化、標識、プロテオミクス施設への提出、データ分析の各ステップの詳細情報を含む最適化されたタンデム質量タグ(TMT)標識プロトコルを提示します。
Tags
TMT Sample Preparation
Proteomics
Protein Extraction
Labeling Efficiency
Reproducibility
Data Acquisition
CHAPS Lysis Buffer
Bead Disruptor
Sonication
Reducing/alkylating Reagent Treatment
TCEP
Iodoacetamide
Methanol/chloroform Precipitation
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