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/
면역학 및 감염병학
/
细菌肽显示用于选择新型生物仿生酶
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JoVE 신문
면역학 및 감염병학
Bacterial Peptide Display for the Selection of Novel Biotinylating Enzymes
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Click here for the English version.
细菌肽显示用于选择新型生物仿生酶
DOI:
10.3791/60266-v
•
10:43 min
•
October 03, 2019
•
Jeff Granhøj
,
Henrik Dimke
2
,
Per Svenningsen
1
Department of Molecular Medicine
,
University of Southern Denmark
,
2
Department of Nephrology
,
Odense University Hospital
Chapters
00:04
Title
00:29
Insertion of Peptide Coding Sequencing Sequence in pBAD BirA-eCPX-AP
01:32
Generation of a BirA Library
03:16
Selection of Bacteria Expressing Biotinylated Peptide
07:18
Quantification of Enrichment
08:26
Results: Model Selection with pBAD-BirA-eCPX-AP and pBAD-BirA-eCPX-AP(K10A)
10:00
Conclusion
Summary
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在这里,我们提出一种方法,以选择
大肠杆菌生物蛋白
的倍酶BirA的新变种,生物异化特定靶肽。该协议描述了用于靶肽的细菌显示的质粒的构造、BirA库的生成、BirA变体的选择和表征。
Tags
Bacterial Peptide Display
Biotinylating Enzymes
BirA
Streptavidin Selection
PCR
Megaprimers
DpnI
T7 Express LysY/Iq Competent E. Coli
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