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화합물 억제, IC50 값, 관절 활성 및 뉴클레오시드 리보하이드라제의 전세포 활성을 결정하기 위한 NMR 기반 활성 반응
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NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases
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화합물 억제, IC50 값, 관절 활성 및 뉴클레오시드 리보하이드라제의 전세포 활성을 결정하기 위한 NMR 기반 활성 반응

DOI:
10.3791/59928-v

•

10:24 min

•

June 30, 2019

•

, , , , , , , , , , ,
1Department of Chemistry,Adelphi University, 2Department of Chemistry,Washington University in St. Louis, 3Department of Chemistry,Boston University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:59Initial Test Compound Assay
  • 05:01Detergent Counter Screen Assay
  • 06:19Jump-Dilution Counter Screen Assays
  • 07:56Results: Representative Nuclear Magnetic Resonance (NMR)-Based Assay Results
  • 09:28Conclusion

Summary

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NMR 기반 활성 세포는 2개의 뉴클레오시드 리보하이드로라제 효소의 억제제를 식별하고 특성화하기 위해 개발되었다. 프로토콜은 500 μM 및 250 μM에서 초기 화합물 분석, IC50 값, 세제 카운터 스크린 분석, 점프 희석 카운터 스크린 분석, 및 대장균 전체 세포에서 분석법을 결정하기 위한 투여 량 반응 분석법을 위해 제공된다.

Tags

NMR-based Activity AssaysEnzyme InhibitionIC50 ValuesArtifact DetectionWhole-cell ActivityNucleoside RibohydrolasesFragment ScreeningTrichomonas VaginalisAnti-trichomonal DrugsReagent VolumesReaction ComponentsSubstrate PreparationTest Compound PreparationReaction Stock SolutionReaction InitiationReaction Quenching

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