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새로운 키나제 단백질의 강력한 생화학 적 접근법을 사용하여 분자 수준에서특성화
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JoVE 신문 생화학
Characterization at the Molecular Level using Robust Biochemical Approaches of a New Kinase Protein
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새로운 키나제 단백질의 강력한 생화학 적 접근법을 사용하여 분자 수준에서특성화

DOI:
10.3791/59820-v

•

11:23 min

•

June 30, 2019

•

, , ,
1Centre de Biophysique Moléculaire, CNRS, UPR 4301,University of Orléans and INSERM

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:24Transient Transfections
  • 03:21Lysis
  • 05:17Immunoprecipitation
  • 06:59Coimmunoprecipitation Analyses
  • 08:33Results: Synthesized LIMK2-1 Protein, Its Interaction with Kinase ROCK, its Kinase Activity
  • 10:10Conclusion

Summary

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우리는 강력한 생화확적인 접근을 사용하여 새로운 키나아제 단백질을 특징으로 했습니다: 다른 세포주 및 조직에 있는 전용적인 항체를 가진 서쪽 얼룩 분석, coimmunocipation 실험에 의하여 상호 작용, 서쪽에 의해 검출된 키나아제 활동 인광 특이적 항체를 사용하여 블롯[32 P] ATP 라벨링에 의해.

Tags

ImmunoprecipitationKinaseProtein ActivitySubstrateP32-ATP LabelingInhibitorLysis ConditionsNegative ControlCell CultureTransfectionCalcium Phosphate

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