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Protocolo in vitro para avaliação de níveis de MicroRNA, funções e genes alvo associados em células tumorais
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An In Vitro Protocol for Evaluating MicroRNA Levels, Functions, and Associated Target Genes in Tumor Cells

Protocolo in vitro para avaliação de níveis de MicroRNA, funções e genes alvo associados em células tumorais

DOI:
10.3791/59628-v

•

09:45 min

•

May 21, 2019

•

, , ,
1Department of Biomedical Science and Research Institute for Bioscience & Biotechnology,Hallym University

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:06MicroRNA (miRNA) Mimic Transfection
  • 02:03Sulforhodamine B (SRB) Assay
  • 03:20Generation of a Dose-response Curve
  • 04:35Verification of the Direct Target Gene of a miRNA of Interest
  • 06:37Luciferase Assay
  • 07:52Results: miRNA-107 Negatively Regulates Proliferation of PANC-1 Cells
  • 08:53Conclusion

Summary

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Este protocolo utiliza uma reação em cadeia da polimerase em tempo real (PCR), um ensaio de sulforhodamina B (SRB), 3 ' regiões não traduzidas (3 ' UTR) clonagem e um ensaio de luciferase para verificar os genes alvo de um miRNA de interesse e para compreender as funções de miRNAs.

Tags

MicroRNAMicroRNA TargetIn Vitro ProtocolTumor CellsCell Viability AssayTransfectionMicroRNA MimicMicroRNA-107

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