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用于评估肿瘤细胞中的微RNA水平、功能和相关靶基因的体外协议
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An In Vitro Protocol for Evaluating MicroRNA Levels, Functions, and Associated Target Genes in Tumor Cells
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
用于评估肿瘤细胞中的微RNA水平、功能和相关靶基因的体外协议
DOI:
10.3791/59628-v
•
09:45 min
•
May 21, 2019
•
Hyun Ah Seo
,
Cho Yean Hwang
,
Sokviseth Moeng
,
Jong Kook Park
1
Department of Biomedical Science and Research Institute for Bioscience & Biotechnology
,
Hallym University
Chapters
00:04
Title
01:06
MicroRNA (miRNA) Mimic Transfection
02:03
Sulforhodamine B (SRB) Assay
03:20
Generation of a Dose-response Curve
04:35
Verification of the Direct Target Gene of a miRNA of Interest
06:37
Luciferase Assay
07:52
Results: miRNA-107 Negatively Regulates Proliferation of PANC-1 Cells
08:53
Conclusion
Summary
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该协议使用基于探针的实时聚合酶链反应(PCR)、磺胺胺B(SRB)测定、3'未翻译区域(3'UTR)克隆和荧光素酶测定来验证感兴趣的miRNA的目标基因,并了解miRNA的功能。
Tags
MicroRNA
MicroRNA Target
In Vitro Protocol
Tumor Cells
Cell Viability Assay
Transfection
MicroRNA Mimic
MicroRNA-107
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