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Cavitação de nitrogênio e centrifugação diferencial permite o monitoramento da distribuição de proteínas de membrana periférica em culturas de células
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Nitrogen Cavitation and Differential Centrifugation Allows for Monitoring the Distribution of Peripheral Membrane Proteins in Cultured Cells

Cavitação de nitrogênio e centrifugação diferencial permite o monitoramento da distribuição de proteínas de membrana periférica em culturas de células

DOI:
10.3791/56037-v

•

08:24 min

•

August 18, 2017

•

,
1Langone Medical Center,New York University

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:41Cell Harvesting
  • 01:35Nitrogen Cavitation
  • 03:31Separation of Cytosolic and Membrane Fractions
  • 05:22Results: Partitioning of Cellular Proteins in Membrane and Cytosolic Fractions
  • 07:07Conclusion

Summary

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Aqui apresentamos os protocolos para homogeneização de detergente livre de células de mamíferos cultivadas com base no azoto cavitação e posterior separação de proteínas do citosol e membrana-limite por ultracentrifugação. Este método é ideal para monitorar o particionamento de proteínas de membrana periférica entre solúvel e fracções de membrana.

Tags

Nitrogen CavitationDifferential CentrifugationPeripheral Membrane ProteinsCultured CellsSubcellular CompartmentalizationHEK293 CellsHomogenization BufferPressurizationProtease InhibitorCell DisruptionFractionationSoluble FractionMembrane Fraction

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