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Cavitazione di azoto e centrifugazione differenziale permette di monitorare la distribuzione periferica delle proteine di membrana in cellule coltivate
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Nitrogen Cavitation and Differential Centrifugation Allows for Monitoring the Distribution of Peripheral Membrane Proteins in Cultured Cells
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Cavitazione di azoto e centrifugazione differenziale permette di monitorare la distribuzione periferica delle proteine di membrana in cellule coltivate

DOI:
10.3791/56037-v

•

08:24 min

•

August 18, 2017

•

,
1Langone Medical Center,New York University

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:41Cell Harvesting
  • 01:35Nitrogen Cavitation
  • 03:31Separation of Cytosolic and Membrane Fractions
  • 05:22Results: Partitioning of Cellular Proteins in Membrane and Cytosolic Fractions
  • 07:07Conclusion

Summary

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Qui presentiamo protocolli per omogeneizzazione detergente privo di cellule di mammiferi coltivate basato su azoto cavitazione e successiva separazione delle proteine citosoliche e membrana-limiti di ultracentrifugazione. Questo metodo è ideale per il monitoraggio il partizionamento periferici delle proteine di membrana tra solubili e frazioni della membrana.

Tags

Nitrogen CavitationDifferential CentrifugationPeripheral Membrane ProteinsCultured CellsSubcellular CompartmentalizationHEK293 CellsHomogenization BufferPressurizationProtease InhibitorCell DisruptionFractionationSoluble FractionMembrane Fraction

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