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Stickstoff-Kavitation und differentielle Zentrifugation ermöglicht eine Überwachung der Verteilung von peripheren Membranproteinen in kultivierten Zellen
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Nitrogen Cavitation and Differential Centrifugation Allows for Monitoring the Distribution of Peripheral Membrane Proteins in Cultured Cells
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Stickstoff-Kavitation und differentielle Zentrifugation ermöglicht eine Überwachung der Verteilung von peripheren Membranproteinen in kultivierten Zellen

DOI:
10.3791/56037-v

•

08:24 min

•

August 18, 2017

•

,
1Langone Medical Center,New York University

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:41Cell Harvesting
  • 01:35Nitrogen Cavitation
  • 03:31Separation of Cytosolic and Membrane Fractions
  • 05:22Results: Partitioning of Cellular Proteins in Membrane and Cytosolic Fractions
  • 07:07Conclusion

Summary

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Hier präsentieren wir Protokolle für Waschmittel-freie Homogenisierung der kultivierten Säugerzellen basierend auf Stickstoff Kavitation und nachträgliche Trennung der cytosolischen und Membrane-springen Proteine durch Ultrazentrifugation. Diese Methode ist ideal für die Überwachung der Partitionierung von peripheren Membranproteinen zwischen löslich und Membran-Fraktionen.

Tags

Nitrogen CavitationDifferential CentrifugationPeripheral Membrane ProteinsCultured CellsSubcellular CompartmentalizationHEK293 CellsHomogenization BufferPressurizationProtease InhibitorCell DisruptionFractionationSoluble FractionMembrane Fraction

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