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면역학 및 감염병학
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Aplicando Transferência de ressonância de fluorescência Energia (FRET) para examinar Eficiência Effector translocação pela<em> Burnetii Coxiella</em> Durante siRNA silenciamento
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Applying Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) to Examine Effector Translocation Efficiency by Coxiella burnetii during siRNA Silencing

Aplicando Transferência de ressonância de fluorescência Energia (FRET) para examinar Eficiência Effector translocação pela<em> Burnetii Coxiella</em> Durante siRNA silenciamento

DOI:
10.3791/54210-v

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10:29 min

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July 06, 2016

•

, ,
1Department of Microbiology and Immunology, Peter Doherty Institute for Infection and Immunity,University of Melbourne

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:02Reverse Transfection of siRNA and Seeding of HeLa 229 Cells
  • 04:25Infection of Reverse Transfected Cells
  • 05:39Addition of BlaM Substrate to Determine Level of Translocation
  • 08:23Results: FRET Measurements of Coxiella burnetti Effector Translocation Efficiency in siRNA Silenced HeLa Cells
  • 09:37Conclusion

Summary

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Investigar as interações entre patógenos bacterianos e seus hospedeiros é uma importante área de pesquisa biológica. Aqui, descrevemos as técnicas necessárias para medir efetoras translocação por Coxiella burnetii durante o silenciamento do gene siRNA usando substrato BlaM.

Tags

FRETEffector TranslocationSiRNA SilencingCoxiella BurnetiiCellular MicrobiologyHost-pathogen InteractionsChlamydiaSalmonellaE. ColiBeta-lactamaseACCM2HeLa CellsTransfection96-well Plate

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