Summary

Espectrometria de massa de cromatografia a gás emparelhada com microextração de fase sólida de vaporização total como ferramenta forense

Published: May 25, 2021
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Summary

A Microextração de Fase Sólida de Vaporização Total (TV-SPME) vaporiza completamente uma amostra líquida enquanto os analitos são sorbados em uma fibra SPME. Isso permite a particionamento do analito entre apenas o vapor solvente e o revestimento de fibra SPME.

Abstract

Cromatografia gasosa – Espectrometria de Massa (GC-MS) é uma técnica frequentemente utilizada para a análise de numerosos analitos de interesse forense, incluindo substâncias controladas, líquidos inflamáveis e explosivos. O GC-MS pode ser acoplado à Microextração de Fase Sólida (SPME), na qual uma fibra com revestimento sorptivo é colocada no espaço da cabeça acima de uma amostra ou imersa em uma amostra líquida. Os analitos são sorbados sobre a fibra que é então colocada dentro da entrada aquecida gc para desorção. A Microextração de Fase Sólida (TV-SPME) utiliza a mesma técnica do SPME de imersão, mas imergi a fibra em um extrato de amostra completamente vaporizado. Esta vaporização completa resulta em uma divisória entre apenas a fase de vapor e a fibra SPME sem interferência de uma fase líquida ou quaisquer materiais insolúveis. Dependendo do ponto de ebulição do solvente utilizado, a TV-SPME permite grandes volumes de amostra (por exemplo, até centenas de microliters). A derivatização on-fiber também pode ser realizada utilizando TV-SPME. A TV-SPME tem sido usada para analisar drogas e seus metabólitos em cabelo, urina e saliva. Esta técnica simples também tem sido aplicada a drogas de rua, lipídios, amostras de combustível, resíduos explosivos pós-explosão e poluentes na água. Este artigo destaca o uso de TV-SPME para identificar adúlteros ilegais em amostras muito pequenas (quantidades de microliteres) de bebidas alcoólicas. Tanto o gama-hidroxibutirato (GHB) quanto o gama-butyrolactona (GBL) foram identificados em níveis que seriam encontrados em bebidas espetadas. A derivação por um agente trimetilsilyl permitiu a conversão da matriz aquosa e GHB em seus derivados TMS. No geral, a TV-SPME é rápida, fácil e não requer preparação de amostra, além de colocar a amostra em um frasco de headspace.

Introduction

A Microextração de Fase Sólida (SPME) é uma técnica de amostragem na qual uma amostra líquida ou sólida é colocada em um frasco de espaço para a cabeça e uma fibra SPME, revestida com um material polimérico, é então introduzida no headspace da amostra (ou imersa em uma amostra líquida). O analito é sorbado sobre a fibra e, em seguida, a fibra é colocada dentro da entrada GC para desorção1,2. A Microextração de Fase Sólida (TV-SPME) é uma técnica semelhante à spme de imersão, mas vaporiza completamente uma amostra líquida antes que os analitos sejam adsorvidos na fibra. Isso permite particionamento do analito entre apenas o vapor solvente e o revestimento da fibra, permitindo que mais do analito seja adsorvida na fibra e resultando em boa sensibilidade3. Existem várias fibras SPME disponíveis e a fibra deve ser escolhida com base no analito de interesse, solvente/matriz e agente de derivatização. Consulte a Tabela 1 para analitos de TV-SPME estabelecidos.

amostra Analyte Fibra SPME recomendada Referência(s)
Cabelo Humano Nicotina, cotinina Polidimethylsiloxano/divinylbenzeno (PDMS/DVB), poliacrilato (PA) 3
Pó sem fumo Nitroglicerina, difenilamina Polidimimetilsiloxano (PDMS), polietileno glicol (PEG) 7, 8
Combustível de corrida Metanol, nitrometano gancho 9
Água Hidrocarbonetos aromáticos policíclicos PDMS 10
Bebidas ɣ-ácido hidroxibutírico, ɣ-butyrolactona PDMS Este Trabalho
Pó Sólido Metanfetamina, anfetamina PDMS/DVB inédito

Mesa 1. Fibras SPME recomendadas com analitos de TV-SPME estabelecidos.

Para realizar a TV-SPME, os analitos são dissolvidos em um solvente e uma alíquota dessa mistura é colocada em um frasco de headspace. As amostras não precisam ser filtradas porque apenas os analitos solventes e voláteis vaporizarão. Devem ser utilizados volumes específicos de amostras líquidas para garantir a vaporização total da amostra. Esses volumes são determinados utilizando-se a Lei do Gás Ideal para calcular o número de mols de um solvente multiplicado pelo volume molar do líquido (Equação 1).
Equation 1 Equação 1

onde Vo é o volume da amostra (mL), P é a pressão de vapor do solvente (barra), Vv é o volume do frasco (L), R é a constante de gás ideal (0,083145 Equation 1 ), M é a massa molar do solvente (g/mol), T é temperatura (K), e é a densidade do Equation 5 solvente (g/mL). 3

Para usar a pressão correta do vapor, a equação de Antoine (Equação 2) é usada para explicar a influência da temperatura:4
Equation 2 Equação 2

onde T é temperatura e A, B e C são as constantes antoine para o solvente. A equação 2 pode ser substituída na Equação 1, rendendo:
Equation 3 Equação 3

A equação 3 dá o volume da amostra (Vo) que pode ser completamente vaporizado em função da temperatura e do solvente utilizado.

Para realizar a derivatização com TV-SPME, a fibra SPME é primeiramente exposta a um frasco contendo o agente de derivatização por um período de tempo predeterminado, dependendo do analito. A fibra SPME é então exposta a um novo frasco contendo o analito de interesse. Este frasco é aquecido dentro de um agitador aquecido. O analito é então adsorvido na fibra com o agente de derivatização. A derivatização do analito e/ou da matriz ocorre na fibra antes de ser inserida na entrada gc para desabedação. A Figura 1 mostra uma representação do processo TV-SPME com derivatização.

Figure 1
Figura 1: Representação do processo TV-SPME com derivatização. A fibra SPME entra primeiro no frasco de derivatização onde o agente de derivatização (círculos amarelos) sorb sobre a fibra. A fibra é então introduzida à amostra (círculos azuis) e aquecida. A formação do derivado (círculos verdes) ocorre na fibra durante o tempo de extração. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

A TV-SPME é benéfica porque permite que o analito seja derivado durante o processo de extração, o que reduz o tempo de análise. Outros métodos, como a injeção líquida, exigem que o analito reaja com o agente derivatante em solução antes de ser injetado no GC. A TV-SPME também requer pouca ou nenhuma preparação amostral. Uma matriz contendo um analito pode ser colocada diretamente no frasco do espaço para a cabeça e analisada. Muitos compostos de interesse são compatíveis com TV-SPME. Os compostos devem ser solúveis em um solvente e suficientemente voláteis para permitir a vaporização. Além disso, os compostos devem ser termicamente estáveis a serem analisados pelo GC-MS. A TV-SPME tem sido usada para analisar drogas e metabólitos de drogas, combustíveis de corrida, hidrocarbonetos aromáticos policíclicos e materiais explosivos3,5,6,7,8,9,10.

Protocol

1. Preparação geral da amostra de TV-SPME e análise de GC-MS NOTA: Se a amostra já estiver dissolvida em uma matriz, pule para o Passo 1.2. Extrair ou dissolver a amostra sólida em solvente suficiente (água, metanol, acetona, etc.) para alcançar a concentração desejada. Amostras líquidas podem ser usadas “como está”.NOTA: A quantidade de amostra sólida utilizada depende da concentração desejada da amostra. Concentrações abaixo de 1 ppm (c/v) são recomendadas para…

Representative Results

Foi realizado um estudo de volume GBL para demonstrar a sensibilidade da TV-SPME em comparação com o headspace e a imersão SPME. Uma amostra de 100ppmv de GBL na água foi preparada e colocada em frascos de headspace de 20 mL com volumes de 1, 3, 10, 30, 100, 300, 1000, 3000 e 10.000 μL. A razão de fase das amostras permitida para TV-SPME (1-3 μL), Headspace SPME (10 – 3.000 μL) e Imersão SPME (10.000 μL). Todas as amostras foram analisadas em triplicado e a área média de pico foi traçada em rela…

Discussion

A TV-SPME tem alguns benefícios sobre a injeção líquida GC em que grandes tamanhos de amostra (por exemplo, 100 μL) podem ser usados sem modificações de instrumentos. A TV-SPME também tem alguns dos mesmos benefícios que o HEADSpace SPME. O SPME do headspace não requer nenhuma extração ou filtragem porque quaisquer compostos não ativos permanecerão no frasco do headspace e não serão adsorvidos na fibra, produzindo uma amostra limpa. Este método também ajuda a eliminar os efeitos da matriz devido a este …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Esta pesquisa foi apoiada pelo Instituto Nacional de Justiça (Prêmio nº 2015-DN-BX-K058 & 2018-75-CX-0035). As opiniões, achados e conclusões aqui expressas são do autor e não refletem necessariamente as das organizações financiados.

Materials

10 µL Syringe Gerstel 100111-014-00
BSTFA + 1% TMCS (10 x 1 GM) Regis Technologies Inc. 50442882
eVol XR Sample Dispensing System Kit ThermoFisher Scientific 66002-024
Equation 6-Butyrolactone (GBL) Sigma-Aldrich B103608-26G
Equation 7-Hydroxy Butyric Acid (GHB) Cayman Chemicals 9002506
Headspace Screw-Thread Vials, 18 mm Restek 23083
Magnetic Screw-Thread Caps, 18 mm Restek 23091
Optima water for HPLC Fisher Chemical W71
SPME Fiber Assembly Polydimethylsiloxane (PDMS) Supelco 57341-U
SPME Fiber Assembly Polydimethylsiloxane/Divinylbenzene (PDMS/DVB) Supelco 57293-U
Topaz 2.0 mm ID Straight Inlet Liner Restek 23313

References

  1. Pawliszyn, J. B. Method and Device for Solid Phase Microextraction and Desorption. United States patent. , (2005).
  2. Pawliszyn, J. . Solid phase microextraction: theory and practice. , (1997).
  3. Rainey, C. L., Bors, D. E., Goodpaster, J. V. Design and optimization of a total vaporization technique coupled to solid-phase microextraction. Analytical Chemistry. 86 (22), 11319-11325 (2014).
  4. Sinnott, R. . Chemical Engineering Design: Chemical Engineering. 6, (2005).
  5. Davis, K. . Detection of Illicit Drugs in Various Matrices Via Total Vaporization Solid-Phase Microextraction (TV-SPME). , (2019).
  6. Ash, J., Hickey, L., Goodpaster, J. Formation and identification of novel derivatives of primary amine and zwitterionic drugs. Forensic Chemistry. 10, 37-47 (2018).
  7. Sauzier, G., Bors, D., Ash, J., Goodpaster, J. V., Lewis, S. W. Optimisation of recovery protocols for double-base smokeless powder residues analysed by total vaporisation (TV) SPME/GC-MS. Talanta. 158, 368-374 (2016).
  8. Bors, D., Goodpaster, J. Mapping smokeless powder residue on PVC pipe bomb fragments using total vaporization solid phase microextraction. Forensic science international. 276, 71-76 (2017).
  9. Bors, D., Goodpaster, J. Chemical analysis of racing fuels using total vaporization and gas chromatography mass spectrometry (GC/MS). Analytical Methods. 8 (19), 3899-3902 (2016).
  10. Beiranvand, M., Ghiasvand, A. Design and optimization of the VA-TV-SPME method for ultrasensitive determination of the PAHs in polluted water. Talanta. 212, 120809 (2020).

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Cite This Article
Davis, K. E., Goodpaster, J. V. Gas Chromatography-Mass Spectrometry Paired with Total Vaporization Solid-Phase Microextraction as a Forensic Tool. J. Vis. Exp. (171), e61880, doi:10.3791/61880 (2021).

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