Le cellule staminali derivate dall'ag virale specifico t linfociti sopprimeno la replica HBV nei topi

A seguito di infezione acuta, il sistema immunitario adattivo (cioè l’immunità umorale e cellulare) controlla la maggior parte dell’epatite acuta correlata all’HBV. Tuttavia, un certo numero di persone nelle regioni HBV-endemiche non può eliminare i virus e successivamente convertirsi come individui cronici. Più del 25% dei pazienti cronici (>250 milioni di persone) in tutto il mondo sviluppa malattie epatiche progressive, con conseguente cirrosi epatica e/o carcinoma epatocellulare (HCC)¹. Di conseguenza, l’eradicazione delle cellule infettate insistenza rimane un problema generale di salubrità, anche se esiste un vaccino² disponibile e numerosi farmaci antivirali sono in fase di sviluppo. Il trattamento standard per l’infezione da HBV include analoghi IFN-z, nucleoside e nucleotide. Questi agenti hanno attività antivirale diretta e capacità modulativi immunitarie. Tuttavia, la sieroconversione dell’antigene HBe (Ag)^– portatori con anticorpo anti-HBe (Ab) e perdita di acido deossiribonucleico HBV del siero compaiono individualmente in circa il 20% dei pazienti trattati e il controllo immunologico completo del virus verificata dalla privazione dell’HBsAg non superiore al 5%³. Inoltre, la risposta al trattamento spesso non è durevole. La vaccinazione profilattica con HBs Ag ricombinante è altamente efficace nella prevenzione dell’infezione, ma la vaccinazione terapeutica hBs Ag non è efficace. Chiaramente, le risposte immunitarie mediate dalle cellule T svolgono un ruolo fondamentale nel controllo dell’infezione da HBV e della compromissione del fegato; tuttavia, nei pazienti cronici con epatite, le cellule T reattive HBV sono spesso eliminate, disfunzionali o convertite esaurite^4,5,6. Di conseguenza, in individui con infezione da HBV persistente, nessun tentativo di ripristinare l’immunità specifica dell’HBV (cioè l’immunità basata sulle cellule T) per mezzo di rimedio anti-virale, citochine immunomodulatori o immunizzazione curativa hanno raggiunto successo.

Il trasferimento di cellule adottive (ACT) di cellule T specifiche DI HBV Ag è un trattamento efficace diretto a sradicare infine i rimanenti epatociti wih HBV^7,8. L’ACT dei CL specifici dell’HBV nei topi infetti da HBV ha dimostrato di causare un calo transitorio e lieve e un calo drammatico nelle trascrizioni di acido ribonucleico HBV (RNA) negli epatociti. In questi studi, i CTL non hanno inibito la trascrizione dei geni HBV, ma hanno migliorato la degradazione delle trascrizioni HBV⁹. Gli HBV specifici sono importanti per prevenire l’infezione virale e mediare l’autorizzazione dell’HBV^10,11. Per i rimedi basati su ACT, l’espansione in vitro di cellule T specifiche HBV con un’elevata reattività per il reinsediamento in vivo è stata suggerita come metodo ideale^12,13,14; tuttavia, gli attuali approcci sono limitati per quanto riguarda la loro capacità di generare, separare e far crescere quantità e qualità appropriate di cellule T specifiche dell’HBV dai pazienti per le potenziali terapie.

Anche se gli studi clinici presentano sicurezza, praticabilità e attività terapeutica prospettica di trattamenti basati sulle cellule per mezzo di cellule T ingegnerizzate specifiche per gli epatociti infettati da virus HBV, ci sono preoccupazioni circa gli effetti sfavorevoli che si verificano da risposte autoimmuni a causa della reattività incrociata da recettori cellulari T (TCR)^15,16, riconoscimento Ag off-target da non specifico TCR¹⁷ e on-target off-toxicity da un recettore Ag chierico (CAR) ¹⁸ mi lato ^{, 19} con tessuti sani. Attualmente, le cellule T geneticamente modificate, che hanno solo persistenza a breve termine in vivo, sono di solito cellule T intermedie o successive. Ad oggi, le cellule staminali pluripotenti (PSC) sono l’unica fonte disponibile per generare un numero elevato di ingenue cellule T singole di tipo G^20,21,22,23. I PSC indotti (iPSC) vengono semplicemente convertiti dalle cellule somatiche di un paziente attraverso l’uso della trasduzione genica di diversi fattori di trascrizione. Di conseguenza, gli iPSC hanno caratteristiche simili a quelle delle cellule staminali embrionali (ESC)²⁴. A causa della flessibilità e della possibilità per l’infinita capacità di auto-rinnovarsi, oltre alla sostituzione dei tessuti, i trattamenti basati su iPSC possono essere ampiamente applicati nella medicina rigenerativa. Inoltre, i reggimenti alla base degli iPSC possono migliorare notevolmente le attuali terapie basate sulle cellule.

L’obiettivo generale di questo metodo è quello di generare una grande quantità di CTL specifici HBV da iPSC (cioè iPSC-CTL) per l’immunoterapia basata su ACT. I vantaggi rispetto alle tecniche alternative sono che gli iPSC-CTL specifici dell’HBV hanno un tCR di tipo singolo e un fenotipo ingenuo, che si traduce in più sviluppo di cellule T di memoria dopo l’ACT. È dimostrato che l’ACT degli iPSC-CTL specifici dell’HBV aumenta la migrazione delle cellule cLAmone CD8 – cLAmmi funzionali nel fegato e riduce la replicazione dell’HBV sia nel fegato che nel sangue dei topi somministrati. Questo metodo rivela un potenziale uso di iPSC-CTL virali specifici dell’Ag per l’immunoterapia HBV e può essere adattato per generare altre cellule iPSC-T virali specifiche dell’Ag per l’immunoterapia virale.