Usando sistemas robóticos para processar e incorporar Colônica murino amostras para análise histológica

Nas últimas décadas, vários modelos experimentais foram desenvolvidos para dissecar os mecanismos patogénicos, levando a doenças humanas^1,2. Para avaliar a gravidade de uma doença, os pesquisadores devem avaliar o efeito de um tratamento e estudar as variações de arquiteturais citológicas e histológicas ou a quantidade de inflamação³. Para executar esses modelos experimentais, detalhadas análises histopatológicas são necessários, muitas vezes comparando amostras de murino e humano^4,5.

Além disso, amostras humanas são comumente processadas e marcou pelas instalações do núcleo de histopatologia e padronizado de experientes patologistas humanos através de critérios histopatológicos e métodos. Por outro lado, murino tecidos são geralmente fixa, incorporados e analisados por pesquisadores com experiência limitada de protocolos histopatológicos. A qualidade e a confiabilidade do exame histopatológico começa com a preparação de cortes de tecido de alta qualidade. Criticamente, vários fatores contribuem para aumentar ou diminuir a qualidade da análise final, incluindo fixação, macroscópica de seccionamento, processamento, parafina incorporação e incorporação de amostras^6,7.

Todas estas passagens envolvendo a manipulação da amostra estão sujeitos a erros manuais, incluindo incorporação manual das amostras e, em menor medida, micrótomo manual de corte e coloração. Neste momento, todo o processo de preparação do tecido murino para avaliação histológica baseia-se nos protocolos manuais e protocolos que variam de laboratório para laboratório. O objetivo deste estudo é implementar protocolos padronizados de automatizado para reduzir erros e variabilidade no exame histopatológico murino.

A nosso conhecimento, nós descrevemos aqui primeiros protocolos para tecido totalmente automatizado de processamento e incorporação para a avaliação histológica dos tecidos murino; Estes são rotineiramente utilizados em unidades de patologia para as análises de amostras humanas. Como um exemplo prático da viabilidade do método, um modelo murino de inflamação intestinal foi analisado, ou seja,, o modelo de colite crônica causada pela administração repetida de sulfato de dextrano de sódio (DSS) na água bebendo^{8 ,9}. Esta configuração experimental de perto se assemelha a humana inflamatória intestinal (IBD) de doenças¹⁰ desde que os animais tratados com DSS exibem sinais de inflamação intestinal, por exemplo, perda de peso, fezes soltas ou diarreia e encurtamento do cólon, bem como fibrose ^8,9,11. Como observado para pacientes humanos IBD, tratamento de DSS gera um curso de doenças complexas. Neste contexto, elaboradas avaliações histológicas são necessários para compreender a profunda alteração da arquitetura do tecido. Assim, a implementação dos protocolos descritos para o aumento da qualidade de preparação de amostra pode beneficiar pesquisadores baseando-se na interpretação do histológico e imuno-histoquímica analisa para configurações experimentais murino. Murino modelos experimentais de doenças humanas que envolvem alterações da arquitetura do tecido, a presença de infiltrado de tecido celular ou inflamação em diferentes tecidos e órgãos (intestino, cérebro, fígado, pele) pode usar o aumento da qualidade da preparação da amostra para exame histopatológico.