Hier presenteren we een protocol om aan te tonen van een efficiënte methode voor de synthese van spirocyclic heterocycles. De vijf-stap proces maakt gebruik van solid-phase synthese en regenereren van Michael linker strategieën. Over het algemeen moeilijk te synthetiseren, presenteren we een aanpasbare methode voor de synthese van spirocyclic moleculen anders ontoegankelijk is voor andere moderne benaderingen.
Een handige synthetische route voor spirocyclic heterocycles is goed gewilde ten gevolge van het molecuul potentiële gebruik in biologische systemen. Door middel van solid-phase synthese, regenereren Michael (REM) linker strategieën en 1,3-Dipolaire cycloadditie, een bibliotheek van structureel vergelijkbare heterocycles, zowel met als zonder een spirocyclic center, figuur kan worden geconstrueerd. De belangrijkste voordelen van de synthese van solid-ondersteuning zijn als volgt: eerst, elke reactiestap kan worden gereden om voltooiing met behulp van een grote overmaat van reagentia resulterend in hoge opbrengsten; volgende, het gebruik van verkrijgbare grondstoffen en reagentia houden de kosten laag; tot slot, de reactie stappen zijn gemakkelijk te zuiveren via eenvoudige filtratie. De strategie van de linker REM is aantrekkelijk vanwege de recycleerbaarheid en spoorloze aard. Zodra een regeling van de reactie is voltooid, kan de linker meerdere malen worden hergebruikt. In een typische solid-phase-synthese bevat het product een deel van of de hele linker, die ongewenste kan aantonen. De REM-linker is “spoorloze” en het punt van bijlage tussen het product en het polymeer is niet te onderscheiden. De hoge diastereoselectivity van de intramoleculaire 1,3-Dipolaire cycloadditie is goed gedocumenteerd. Beperkt door de oplosbaarheid van de solide steun, de reactie progressie kan alleen worden gecontroleerd door een verandering in de functionele groepen (indien aanwezig) via infrarood (IR) spectroscopie. Dus, kan niet de structurele identificatie van tussenproducten worden gekenmerkt door conventionele nucleaire magnetische resonantie (NMR) spectroscopie. Andere beperkingen met betrekking tot deze methode vloeien voort uit de compatibiliteit van de polymeer/linker voor de regeling van de gewenste chemische reactie. Hierin verslag wij een protocol waarmee handig voordeproductie van spirocyclic-heterocycles, die met eenvoudige wijzigingen, kunnen worden geautomatiseerd met high-throughput technieken.
Ondanks recente ontdekkingen zeer matiemaatschappij spirocyclic heterocyclische verbindingen met een aantal biologische systemen1, is een handige traject nog steeds noodzakelijk voor de productie ervan eenvoudig. Dergelijke systemen en toepassingen voor deze heterocycles omvatten: MDM2 inhibitie en andere antikanker activiteiten2,3,4,5, enzym inhibitie6,7,8 , antibiotische werking9,10, fluorescerende tagging10,11,12, enantioselectieve bindend voor DNA-sondes13,14, 15 en RNA gericht op16, samen met talrijke toepassingsmogelijkheden therapeutics17,18,19. Met een stijgende vraag naar deze heterocycles blijft de huidige literatuur verdeeld over welke synthetische traject is het beste. Moderne synthetische benaderingen van dit probleem isatine en isatine derivaten gebruiken als grondstof voor een verscheidenheid van heterocycles20,21, ingewikkelde intramoleculaire herschikkingen22,23 ,24,25, Lewis zuur1,26,27 of overgangsmetalen katalyse17,28,29, 30, of asymmetrische processen31. Hoewel deze procedures hebben gehad succes in het produceren van specifieke spirocyclic oximes met beperkte functionaliteit, is een synthetische strategie voor het produceren van een bibliotheek van moleculen met hoge diastereoselectivity onderzocht relatief minder32geweest.
De techniek die hier gepresenteerd blijkt dat deze moleculen van belang kunnen worden gegenereerd met behulp van een aantal goed begrepen synthetische technieken in tandem. Beginnend met de synthese van het molecuul op een stevige steun met behulp van een REM linker en intramoleculaire silyl nitronaat-olefine cycloadditie (ISOC), de voorgestelde route implementeert een niet-lineaire route, gekenmerkt door bond versnijden in een tricyclische systeem, waardoor een zeer matiemaatschappij heterocycle. REM linkers, gekend voor hun gemak en de recycleerbaarheid, gebruik maken van een stevige steun te synthetiseren tertiaire amines33. Vanwege het gemak van de zuivering geaccrediteerd aan de REM linker via eenvoudige filtratie, biedt deze solid-phase synthese techniek wetenschappers met een recycleerbaar en spoorloze linker, die hier is gebruikt. Zodra de reactie voltooid is, wordt de linker REM wordt geregenereerd en kan meerdere malen worden hergebruikt. De REM-linker is ook spoorloze omdat, in tegenstelling tot vele solid-phase linkers, het punt van bijlage tussen het product en het polymeer te onderscheiden34,35. Ook goed bestudeerde en te begrijpen is de reactie van de ISOC, nuttig bij de synthese van pyrrolidine oximes36,37. Misschien beter bekend als een 1,3-Dipolaire cycloadditie, deze reacties vormen een aantal heterocycles met hoge diastereoselectivity38,39,40,41,42 , 43 , 44 , 45. met behulp van de gewijzigde REM-combinatie-ISOC techniek voor de synthese van spirocyclic moleculen een zeer diastereoselective product levert. Hierin, rapporteren wij over de efficiënte productie van spirocyclic oximes met behulp van een nieuwe synthetische aanpak, het combineren van twee goed begrepen trajecten en gemakkelijk beschikbare grondstoffen.
In een typische REM linker/solid-phase synthetische strategie, voorafgaand aan de release van een amine van de solide steun, is het essentieel om te vormen van een quaternair ammoniumzout, zoals beschreven in sectie 4 van het protocol39. Als gevolg van de sterische hinder van de tricyclische systeem en omvangrijk R2 groepen (benzyl en octyl halogeniden), kunnen slechts een klein alkylerend reagentia (methyl en allyl halogeniden) worden gebruikt in deze reactie46….
The authors have nothing to disclose.
Dit werk werd gefinancierd door een subsidie van de faculteit Research Council K.S. Huang (Azusa Pacific University – Verenigde Staten). C.R. Drisko is een ontvanger van de John Stauffer beurs en de Gencarella Undergraduate Research Grant. S.A. Griffin ontving een S2S Undergraduate Research Fellowship van het departement biologie en chemie.
Auteurs (van links naar rechts) Cody Drisko, Dr. Kevin Huang en Silas Griffin de experimenten en bereid het manuscript. Cody Drisko is een John Stauffer Fellow en een ontvanger van de subsidie van Gencarela onderzoek. Silas is een S2S Azusa Pacific University Research Fellow. Dr. Kevin Huang verstrekt het onderzoek mentorschap en is een ontvanger van de Azusa Pacific University faculteit onderzoek Raad subsidie.
Chemicals | |||
REM Resin | Nova Biochem | 8551010005 | Solid Polymer Support; 1.1 mmol/g loading |
Furfurylamine | Acros Organics | 119800050 | Reagent |
Dimethylformamide (DMF) | Sigma-Aldrich | 227056 | Solvent |
Dichloromethane (DCM) | Sigma-Aldrich | 270997 | Solvent |
Methanol | Sigma-Aldrich | 34860 | Solvent |
trans-4-bromo-β-nitrostyrene | Sigma-Aldrich | 400017 | Nitro-olefin solid |
trans-3,4-dimethoxy-β-nitrostyrene | Sigma-Aldrich | S752215 | Nitro-olefin solid |
trans-2,4-dichloro-β-nitrostyrene | Sigma-Aldrich | 642169 | Nitro-olefin solid |
trans-β-nitrostyrene | Sigma-Aldrich | N26806 | Nitro-olefin solid |
Triethylamine (TEA) | Sigma-Aldrich | T0886 | Solvent |
Trimethylsilyl chloride (TMSCl) | Sigma-Aldrich | 386529 | Reagent; CAUTION – highly volatile; creates HCl gas |
Tetra-n-butylammonium fluoride (TBAF) in Tetrahydrofuran (THF) | Sigma-Aldrich | 216143 | Reagent |
Tetrahydrofuran (THF) | Sigma-Aldrich | 401757 | Reagent |
1-Bromooctane | Sigma-Aldrich | 152951 | Alkyl-halide |
Iodomethane | Sigma-Aldrich | 289566 | Alkyl-halide |
Allylbromide | Sigma-Aldrich | 337528 | Alkyl-halide |
Benzylbromide | Sigma-Aldrich | B17905 | Alkyl-halide |
Glassware/Instrumentation | |||
25 mL solid-phase reaction vessel | Chemglass | CG-1861-02 | Glassware with filter |
Thermo Scientific Nicole iS5 | Thermo Scientific | IQLAADGAAGFAHDMAZA | Instrument |
AVANCE III NMR Spectrometer | Bruker | N/A | Instrument; 300 MHz; Solvents: CDCl3 and CD3OH |
Wrist-Action Shaker Model 75 | Burrell Scientific | 757950819 | Instrument |