Summary

Chirurgia Stereotassica roditori e animali Miglioramenti Esito di assistenza sociale per Behavioral Neuroscience

Published: January 30, 2012
doi:

Summary

Chirurgia stereotassica sui roditori permette per la somministrazione mirata di farmaci o di stimolazione elettrica e le registrazioni in sveglio, comportandosi animali. In questo video di presentazione mostreremo recenti perfezionamenti procedurali a questa lunga procedura che il tasso di sopravvivenza con successo migliorato e ridotto post-chirurgica perdita di peso.

Abstract

Chirurgia stereotassica per l'impianto di cannule in regioni specifiche del cervello è stata per molti decenni una tecnica di grande successo sperimentale per studiare gli effetti del neurotrasmettitore a livello locale manipolati e vie di segnalazione in sveglio, gli animali si comportano. Inoltre, l'impianto stereotassico di elettrodi per la stimolazione elettrofisiologica e studi di registrazione è stato determinante per la nostra comprensione attuale della neuroplasticità del cervello e delle reti nel comportarsi animali. Conoscenza sempre più su come ottimizzare le tecniche chirurgiche nei roditori 1-4, sensibilizzazione sulle questioni del benessere degli animali e legislazione (ad esempio, per il 2010 la direttiva dell'Unione Europea sull'uso degli animali da laboratorio 5) ci hanno spinto ad affinare queste procedure chirurgiche, con particolare riguardo ad attuare nuove procedure per la supplementazione di ossigeno e il monitoraggio continuo di ossigenazione del sangue e dei livelli di frequenza cardiaca durante l'intervento così comel'introduzione di un protocollo standardizzato per la cura post-chirurgica. Le nostre osservazioni indicano che queste modifiche ha comportato un tasso di aumento della sopravvivenza e un miglioramento delle condizioni generali degli animali dopo l'intervento chirurgico (ad esempio la perdita di peso in meno e un animale più attivo). Questa presentazione video mostrerà le procedure generali coinvolti in questo tipo di chirurgia stereotassica con particolare attenzione alle nostre diverse modifiche. Si illustreranno queste procedure chirurgiche nei ratti, ma è anche possibile eseguire questo tipo di intervento chirurgico nei topi o altri piccoli animali da laboratorio, utilizzando adattatori speciali per l'apparato stereotassico 6.

Protocol

Nota: le tecniche di antisettico devono essere impiegati durante l'intera procedura. Tutti gli strumenti ed i materiali (cotone con punta tamponi, garze, ecc) che verranno utilizzati durante l'intervento chirurgico dovrebbe essere sterilizzati in autoclave. Una mascherina chirurgica, cofano capelli e guanti sterili devono essere indossati. L'area di lavoro e l'apparato stereotassico devono essere puliti accuratamente, e disinfettati con una soluzione di etanolo al 70%. 1. Pre-c…

Discussion

Lo scopo principale di questo video di presentazione è quello di familiarizzare i neuroscienziati comportamentali con i principi fondamentali della chirurgia stereotassica. I ricercatori che stanno già eseguendo la chirurgia stereotassica potrebbe anche beneficiare di questo video e prendere in considerazione alcuni dei perfezionamenti procedurali per l'uso in proprio laboratorio. Una sempre maggiore conoscenza su come ottimizzare le tecniche chirurgiche 1-3, lo sviluppo di nuovi anestetici e analgesici…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Gli autori ringraziano il Dott. Pietro Gerrits per i disegni utilizzati nel video.

Materials

Name of the reagent Company
Alcohol 70% VWR
Antisedan (atipamezole) Orion
Atropine sulfate 0,5 Pharmachemie BV
Bulldog haemostatic clamp Aesculap
Cannulas Component Supply Co.
Chlorhexidine 0.5% AppepPharma
Cleaning powder Alconox
Cotton sticks Hartmann BV
Dexdomitor (dexmedetomidine) Orion
Drill Dremel 8000
Duratears Z Alcon
Durogrip Naaldvoerder converse 130mm Aesculap
Durotip Fijne schaar ret.sp/st 110 mm Aesculap
Gauze Medicomp (5×5)
Heating pad Harvard Apparatus
Insect pins (stylets) Entosphinx (Czech Republik)
Ketamine 10% (ketamine) Alfasan
Micro-halsted straight tip Aesculap-vet
Molinea Hartmann BV
NaCl 0,9% Baxter
Needles (25G) Terumo
Oximeter Edan Instruments, Inc.
Pentobarbital Pharmacy of the UMCG
Rimadyl Pfizer
Scalpel blade No. 23 Swann Morton
Scalpelholder NR. 4 133 mm Aesculap
Screw driver conventional Hardware Store
Simplex Rapid (dental cement) Kemdent
Skull screws Component Supply Co.
Spatula VWR
Spongestan special Johnson & Johnson
Stereotacts Kopf Instruments
Surgical forceps 100mm Aesculap
Suture material Safil 5/0 Aesculap
Syringe 10 ml Omnifix
Syringe 1ml Terumo
Syringe 5ml Omnifix
Xylocaine (lidocaine/adrenaline) Astra Zeneca

References

  1. Russell, W. M. S., Burch, R. L. . The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).
  2. Richardson, C. A., Flecknell, P. A. Anaesthesia and post-operative analgesia following experimental surgery in laboratory rodents: are we making progress?. Altern. Lab Anim. 33, 119-127 (2005).
  3. Stokes, E. L., Flecknell, P. A., Richardson, C. A. Reported analgesic and anaesthetic administration to rodents undergoing experimental surgical procedures. Lab Anim. 43, 149-154 (2009).
  4. Flecknell, P. A. . Laboratory Animal Anaesthesia – A Practical Introduction for Research Workers and Technicians. , (2009).
  5. . DIRECTIVE 2010/63/EU OF THE EUROPEAN PARLIAMENT AND OF THE COUNCIL of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes. Official Journal of the European Union. , (2010).
  6. Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents. J. Vis. Exp. (20), e880-e880 (2008).
  7. Hellebrekers, L. J., Booij, L. H. D. J., Flecknell, P. A., Van Zutphen, L. F. M., Baumans, V., Beynen, A. C. Anaesthesia, analgesia and euthanasia. Principles of Laboratory Animal Science. , 277-311 (2001).
  8. Walantus, W., Elias, L., Kriegstein, A. In utero intraventricular injection and electroporation of E16 rat embryos. J. Vis. Exp. (6), e236-e236 (2007).
  9. Paxinos, G., Watson, C. . The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. , (1986).
  10. Paxinos, G., Watson, C. . The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. , (2007).
  11. Swanson, L. W. . Brain Maps: Structure of the Rat Brain. , (1992).

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Cite This Article
Fornari, R. V., Wichmann, R., Atsak, P., Atucha, E., Barsegyan, A., Beldjoud, H., Messanvi, F., Thuring, C. M., Roozendaal, B. Rodent Stereotaxic Surgery and Animal Welfare Outcome Improvements for Behavioral Neuroscience. J. Vis. Exp. (59), e3528, doi:10.3791/3528 (2012).

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