Summary

מערך Multielectrode הקלטות של האפיתל Vomeronasal

Published: March 01, 2010
doi:

Summary

מערך Multielectrode (MEA) הקלטות לספק שיטה ללימוד את הפעילות החשמלית של אוכלוסיות גדולות של נוירונים. כאן, אנו מציגים את הפרטים של הכנה MEA להקליט האפיתל עכבר vomeronasal ובמקביל מגרה את הרקמות.

Abstract

הבנת מעגלים עצביים דורש שיטות להקליט נוירונים רבים בו זמנית. עבור<em> במבחנה</em> מחקרים, אחד הטכנולוגיה זמין כרגע הוא multielectrode מישוריים מערך (MEA) ההקלטה. כאן אנו מסמך השימוש MEAs ללמוד את העכבר vomeronasal איבר (VNO), אשר ממלא תפקיד חיוני זיהוי של פרומונים ו רמזים חברתיים באמצעות אוכלוסיה מגוונת של עצב סנסורי להביע מאות סוגי קולטנים. שילוב של הקלטה MEA עם המטפל נוזל רובוטית לספק גירויים כימיים, התגובות חושית של אוכלוסיה גדולה ומגוונת של נוירונים ניתן להקליט. הכנה מאפשר לנו להסיר את neuroepithelium שלם של VNO מן העכבר לגרות עם סוללה של כימיקלים או ligands פוטנציאל תוך מעקב אחר הפעילות החשמלית של הנוירונים במשך כמה שעות. לכן, טכניקה זו משמשת כאמצעי יעיל בהערכת פעילות ליגנד כמו גם לחקור את המאפיינים של נוירונים הקולטן. אנו מציגים את הטכניקות צורך להכין את האפיתל vomeronasal, הקלטה MEA, וכן גירוי כימי.

Protocol

חלק 1. הקלטה חשמל מכשור אנו משתמשים במערך multielectrode מישוריים (ALA מכשירים מדעיים) עם 10 מיקרומטר שטוח ניטריד טיטניום אלקטרודות מבודדים עם סיליקון ניטריד. 60 אלקטרודות מסודרים בשני תחומי המורכב מרשת 5×6 עם מרווח בין מרכז אל מר…

Discussion

מערך הקלטות Multielectrode לאפשר לנו את היכולת לפקח על הפעילות סימולטני של אוכלוסייה גדולה של נוירונים. זהו כלי שימושי עבור לחקור את המאפיינים של מערכת החושים, במיוחד את VNO. בניגוד למערכת חוש הריח העיקרי, VNO מזהה גירויים בשלב נוזלי. בנוסף, VNO היא רקמה הטרוגנית. ישנם כ 300 סוגים ש…

Acknowledgements

ברצוננו להודות לחברי מעבדה הקודש. עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי לחירשות והפרעות תקשורת (R01 DC005964 ל) ו-NSF IGERT 0,548,890 (הא).

ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם ארצות הברית הרווחה מעשי בעלי חיים National Institutes of הנחיות בריאות אושרו על ידי טיפול בבעלי חיים באוניברסיטת וושינגטון ועדת שימוש.

References

  1. Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
  2. Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
  3. Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).

Play Video

Cite This Article
Arnson, H. A., Fu, X., Holy, T. E. Multielectrode Array Recordings of the Vomeronasal Epithelium. J. Vis. Exp. (37), e1845, doi:10.3791/1845 (2010).

View Video