Multieletrodo Recordings Matriz do Epitélio Vomeronasal
Summary
Multieletrodo array (MEA) gravações de fornecer um método para o estudo da atividade elétrica de grandes populações de neurônios. Aqui, apresentamos os detalhes de uma preparação MEA para gravar a partir do epitélio do mouse vomeronasal, ao mesmo tempo estimulando o tecido.
Abstract
Compreender os circuitos neurais requer métodos para gravar a partir de muitos neurônios simultaneamente. Para<em> In vitro</em> Estudos, uma tecnologia atualmente disponível é planar multieletrodo variedade de gravação (MEA). Aqui nós documentamos o uso de MEAs para estudar o rato órgão vomeronasal (VNO), que desempenha um papel essencial na detecção de feromônios e sinais sociais através de uma população diversificada de neurônios sensoriais expressando centenas de tipos de receptores. Combinando gravação MEA com um manipulador robótico líquido para entregar estímulos químicos, as respostas sensoriais de uma população grande e diversificada de neurônios pode ser gravado. A preparação nos permite remover o neuroepitélio intacta do VNO do mouse e estimular com uma bateria de produtos químicos ou ligantes potencial enquanto monitora a atividade elétrica dos neurônios durante várias horas. Portanto, essa técnica serve como um método útil para avaliar a atividade ligante, bem como explorar as propriedades dos neurônios receptores. Nós apresentamos as técnicas necessárias para preparar o epitélio vomeronasal, gravação de MEA, e estimulação química.
Protocol
Discussion
Gravações série multieletrodo permitem-nos a capacidade de monitorar a atividade simultânea de uma grande população de neurônios. Esta é uma ferramenta útil para investigar as propriedades de um sistema sensorial, especificamente o VNO. Ao contrário do sistema olfatório, o VNO detecta estímulos em fase líquida. Além disso, o VNO é um tecido heterogêneo. Existem aproximadamente 300 tipos diferentes de receptores no mouse 1, presumivelmente com perfis de resposta diferentes. Gravações MEA comb…
Acknowledgements
Gostaríamos de agradecer aos membros do Laboratório Santo. Este trabalho foi financiado pelo Instituto Nacional de Surdez e Distúrbios da Comunicação (R01 DC005964 para THE) e NSF IGERT 0.548.890 (HAA).
Experimentos em animais foram realizados de acordo com os Estados Unidos Atos Animal Welfare e Institutos Nacionais de Saúde e diretrizes foram aprovadas pelo Animal Care Washington University e do Comitê Use.
References
- Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
- Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
- Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).
