Overview
Este video describe una técnica de mastectomía radical, que se utiliza para la extirpación quirúrgica de toda la glándula mamaria de un ratón para estudiar la progresión del cáncer.
Protocol
1. Mastectomía
NOTA: El momento de la mastectomía es muy importante. Si se hace demasiado pronto, no se produce metástasis pulmonar. Si se hace demasiado tarde, el tumor primario ha invadido los vasos sanguíneos principales, que hacen que una resección oncológica completa sea difícil. Por lo tanto, se probaron varios puntos de tiempo para la mastectomía para determinar qué punto de tiempo produjo el equilibrio adecuado a la espera de metástasis antes de que la resección se volviera demasiado difícil. Después de hacerlo en más de 50 experimentos con ratones, se demostró que la mastectomía a los 8 días después de la inoculación de células cancerosas (o cuando el tamaño del tumor alcanza los 5 mm) era el punto de tiempo ideal para lograr ese equilibrio.
- Anestesiar un ratón con 2-4% de isoflurano y 0,2 L/min de flujo de oxígeno hasta que los ratones respiren tranquilamente (2-3 min) e inyecten 0,05 mg/kg de buprenorfina en su hombro subcutáneamente.
- Restrinja las extremidades del ratón usando cinta de laboratorio y esterilizar su piel usando clorhexidina, yodo y 75% etanol, usando hisopos de algodón.
- Hacer una incisión cutánea de 5 mm 2 mm a la izquierda de la cicatriz quirúrgica que se hizo en la inoculación inicial de la célula cancerosa, utilizando las tijeras de microdisección. Extienda la incisión hacia la raíz de la extremidad delantera para extirpar el tumor, la piel incluida la cicatriz quirúrgica y la lesión en contacto con el tumor, así como la cuenca del ganglio linfático axilario en la que la mayoría de las veces no existe ningún ganglio linfático visible en el momento de la mastectomía. Asegúrese de no dañar la vena axilar.
- Cierre los defectos de la piel cosiendo, usando suturas estériles 5-0 no absorbibles en forma de "Y".
- Devuelve el ratón a una jaula limpia y monitor hasta que se hayan recuperado y se muevan libremente (después de ~1–2 min). Si un animal no parece estar en buen estado de salud dentro de las 24 h de la cirugía, administrar buprenorfina (0,2 mg/kg).
- Retire las suturas bajo anestesia (con 2-4% de isoflurano y flujo de oxígeno de 0,2 L/min) 7 días después de la cirugía.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |