Overview
Deze video beschrijft een techniek van radicale mastectomie, die wordt gebruikt voor de chirurgische verwijdering van de hele borstklier van een muis om de progressie van kanker te bestuderen.
Protocol
1. Mastectomie
OPMERKING: De timing van de mastectomie is erg belangrijk. Als het te vroeg wordt gedaan, treedt longmetastase niet op. Als het te laat wordt gedaan, is de primaire tumor grote bloedvaten binnengedrongen, wat een volledige oncologische resectie uitdagend maakt. Zo werden meerdere tijdspunten getest op mastectomie om te bepalen welk tijdspunt de juiste balans produceerde in het wachten op metastase voordat resectie te uitdagend werd. Na dit te hebben gedaan in meer dan 50 muisexperimenten, werd aangetoond dat mastectomie na 8 dagen na de inenting van kankercellen (of wanneer de tumorgrootte 5 mm bereikt) het ideale moment was om die balans te bereiken.
- Verdoof een muis met 2-4% isofluraan en 0,2 L/min zuurstofstroom totdat de muizen rustig ademen (2-3 min) en 0,05 mg/kg buprenorfine subcutaan in zijn schouder injecteren.
- Houd de ledematen van de muis vast met behulp van laboratoriumtape en steriliseer de huid met chloorhexidine, jodium en 75% ethanol met wattenstaafjes.
- Maak een 5 mm huidincisie 2 mm naar links van het chirurgische litteken dat werd gemaakt bij de eerste inenting van de kankercel, met behulp van de microdissectieschaar. Breid de incisie uit naar de wortel van de voorpoten om de tumor, de huid inclusief het chirurgische litteken en de laesie in contact met de tumor te verwijderen, evenals het oksellymfeklierbassin waarin meestal geen zichtbare lymfeklier bestaat op het moment van de mastectomie. Zorg ervoor dat u de okselader niet beschadigt.
- Sluit de huidafwijkingen door te borduren, met steriele 5-0 niet-absorbeerbare hechtingen in de vorm van een "Y".
- Breng de muis terug naar een schone kooi en controleer totdat ze zijn hersteld en vrij bewegen (na ~ 1-2 minuten). Als een dier niet binnen 24 uur na de operatie in goede gezondheid lijkt te zijn, dient u buprenorfine (0,2 mg/kg) toe te dienen.
- Verwijder de hechtingen onder narcose (met 2-4% isofluraan en 0,2 L/min zuurstofstroom) 7 dagen na de operatie.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |