Overview
此视频描述了一种激进的乳房切除术技术,用于从小鼠身上手术切除整个乳腺,以研究癌症进展。
Protocol
1. 乳房切除术
注:乳房切除术的时机非常重要。如果做得太早,就不会发生肺转移。如果做得太晚,原肿瘤已经侵入了主要血管,这使得完全的肿瘤切除具有挑战性。因此,对乳房切除术进行了多个时间点测试,以确定哪个时间点在等待转移时产生了适当的平衡,然后切除变得过于具有挑战性。在50多个小鼠实验中,经过实验证明,癌细胞接种后8天(或肿瘤大小达到5毫米时)的乳房切除术是实现这种平衡的理想时间点。
- 麻醉小鼠2-4%异氟兰和0.2升/分钟的氧气流,直到小鼠平静地呼吸(2~3分钟),并注射0.05毫克/千克丁丙诺啡到其肩部皮下。
- 使用实验室胶带抑制小鼠的四肢,使用氯西丁、碘和75%乙醇用棉签对皮肤进行消毒。
- 使用微分切刀,从最初癌细胞接种时产生的手术疤痕中向左切开 5 毫米皮肤切口 2 毫米。将切口伸向前肢根部以切除肿瘤、皮肤(包括手术疤痕)和与肿瘤接触的病变,以及在乳房切除术时大部分时间不存在可见淋巴结的辅助淋巴结盆。确保不损坏辅助静脉。
- 通过缝合来关闭皮肤缺陷,使用无菌的 5-0 不可吸收的缝合线,形状为"Y"。
- 将鼠标放回干净的笼子,并监视器,直到它们恢复并自由移动(1~2分钟后)。如果动物在手术后24小时内身体状况不佳,服用丁丙诺啡(0.2毫克/千克)。
- 手术后7天取出麻醉下的缝合线(2-4%异氟兰和0.2L/分钟氧气流)。
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |