Overview
Denne video beskriver en teknik med radikal mastektomi, som bruges til kirurgisk fjernelse af hele brystkirtlen fra en mus for at studere kræft progression.
Protocol
1. Mastektomi
BEMÆRK: Timingen af mastektomi er meget vigtig. Hvis det gøres for tidligt, forekommer lungemetastase ikke. Hvis det gøres for sent, den primære tumor har invaderet store blodkar, som gør en komplet onkologiske resektion udfordrende. Således blev flere tidspoint testet for mastektomi for at bestemme, hvilket tidspunkt der producerede den rette balance i at vente på metastase, før resektion blev for udfordrende. Efter at have gjort det i over 50 museeksperimenter blev det påvist, at mastektomi på 8 dage efter kræftcelleinokulation (eller når tumorstørrelsen når 5 mm) var det ideelle tidspunkt at opnå denne balance.
- Bedøve en mus med 2-4% isoflurane og 0,2 L/min ilt flow, indtil musene trække vejret roligt (2-3 min) og injicere 0,05 mg/kg buprenorphin i skulderen subkutant.
- Restrain musens lemmer ved hjælp af lab tape og sterilisere sin hud ved hjælp af klorhexidin, jod, og 75% ethanol, ved hjælp af vatpinde.
- Lav en 5 mm hud snit 2 mm til venstre fra den kirurgiske ar, der blev foretaget på den oprindelige kræft celle podning, ved hjælp af microdissection saks. Udvid snittet mod roden af forbenene for at fjerne tumoren, huden inklusive det kirurgiske ar og læsionen i kontakt med tumoren samt aksillærlymfeknudebassinet, hvor det meste af tiden findes der ingen synlig lymfeknude på tidspunktet for mastektomi. Sørg for ikke at beskadige aksillær venen.
- Luk huddefekterne ved syning ved hjælp af sterile 5-0 ikke-absorberbare suturer i form af et "Y".
- Returner musen til et rent bur og overvåge, indtil de er kommet sig og bevæger sig frit (efter ~ 1-2 min). Hvis et dyr ikke synes at være ved godt helbred inden for 24 timer efter operationen, skal buprenorphin (0,2 mg/kg) gives.
- Fjern suturerne under anæstesi (med 2-4% isofluran og 0,2 L/min iltstrøm) 7 dage efter operationen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |