Drosophila Erkek Aksesuar Bezi Diseksiyonu: İkincil Hücreleri İzole Etme Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Immarigeon, C., vd. Drosophila Erkek Aksesuar Bezlerinin İkincil Hücrelerinden RNA’yı İzole Etmek için FACS Tabanlı Bir Protokol. J. Vis. Exp. (2019).
Bu video, aksesuar bezlerinin erkek sineklerden ayrıştırılmasını açıklar ve izole bezin tek bir hücre süspansiyonuna ayrıştırılacağı bir örnek gösterir.
Protocol
Bu protokol, RNA’yı Drosophila Erkek Aksesuar Bezlerinin İkincil Hücrelerinden İzole Etmek için FACS tabanlı bir Protokol olan Immarigeon ve ark.’dan bir alıntıdır, J. Vis. Exp. (2019). 1. Çözümler ve Malzeme Hazırlama Aşağıdaki çözümleri hazırlayın. Serum Takviyeli Orta (SSM) Hazırlayın: Schneider’ın Drosophila ortamı% 10 ısı inaktive fetal sığır serumu ve% 1 Penisilin-Streptomisin ile tama…
Materials
| Binocular microscope for dissection | |||
| Binocular with light source for GFP | |||
| Bunsen | |||
| Plastic microtubes 1.5 mL | Eppendorf | ||
| Fine dissection forceps | |||
| Foetal bovine serum | Gibco | 10270-106 | heat inactivated prior to use |
| Glass dishes for dissection | |||
| Ice bucket | |||
| P1000 | Gilson | ||
| P20 | Gilson | ||
| P200 | Gilson | ||
| Papain | 50U/mL stock | ||
| PBS | home made | ||
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| Schneider’s Drosophila medium | Gibco | 21720-001 | |
| Tipone 1250 μL graduated tip | Starlab | S1161-1820 | |
| Tipone 200 μL bevelled tip | Starlab | S1161-1800 | |
| TrypLE Express Enzyme | Gibco | 12604013 |
Citazione di questo articolo
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).