Drosophila Disección de glándulas accesorios masculinas: un método para aislar las células secundarias

Published: April 30, 2023

Abstract

Fuente: Immarigeon, C., et al. Un protocolo basado en FACS para aislar el ARN de las células secundarias de las glándulas accesorios masculinas de Drosophila. J. Vis. (2019).

Este video describe la disección de las glándulas accesorias de las moscas masculinas y muestra un ejemplo en el que la glándula aislada se disociará en una sola suspensión celular.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Immarigeon et al., Un protocolo basado en FACS para aislar el ARN de las células secundarias de las glándulas accesorios masculinas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2019). 1. Soluciones y preparación de materiales Prepare las siguientes soluciones. Preparar medio suero suplementado (MUS): Medio de Drosophila de Schneider complementado con 10% suero bovino fetal inactivado por calor y 1% pe…

Materials

Binocular microscope for dissection
Binocular with light source for GFP
Bunsen
Plastic microtubes 1.5 mL Eppendorf
Fine dissection forceps
Foetal bovine serum Gibco 10270-106 heat inactivated prior to use
Glass dishes for dissection
Ice bucket
P1000 Gilson
P20 Gilson
P200 Gilson
Papain 50U/mL stock
PBS home made
Penicillin-Streptomycin Gibco 15070-063
Schneider’s Drosophila medium Gibco 21720-001
Tipone 1250 μL graduated tip Starlab S1161-1820
Tipone 200 μL bevelled tip Starlab S1161-1800
TrypLE Express Enzyme Gibco 12604013

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Citazione di questo articolo
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).

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