Drosophila Männliche Zubehör Drüsensektion: Eine Methode, um sekundäre Zellen zu isolieren
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Immarigeon, C., et al. A FACS-based Protocol to Isolate RNA from the Secondary Cells of Drosophila Male Accessory Dlands. J. Vis. (2019).
Dieses Video beschreibt die Zerlegung der Zubehördrüsen von männlichen Fliegen und zeigt ein Beispiel, in dem die isolierte Drüse in eine einzellige Suspension zerlegt wird.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Immarigeon et al.,A FACS-based Protocol to Isolate RNA from the Secondary Cells of Drosophila Male Accessory Dlands, J. Vis. Exp. (2019). 1. Lösungen und Materialvorbereitung Bereiten Sie die folgenden Lösungen vor. Serum Supplemented Medium (SSM): Schneiders Drosophila Medium ergänzt durch 10% hitzeinaktiviertes fetales Rinderserum und 1% Penicillin-Streptomycin. Aliquot…
Materials
| Binocular microscope for dissection | |||
| Binocular with light source for GFP | |||
| Bunsen | |||
| Plastic microtubes 1.5 mL | Eppendorf | ||
| Fine dissection forceps | |||
| Foetal bovine serum | Gibco | 10270-106 | heat inactivated prior to use |
| Glass dishes for dissection | |||
| Ice bucket | |||
| P1000 | Gilson | ||
| P20 | Gilson | ||
| P200 | Gilson | ||
| Papain | 50U/mL stock | ||
| PBS | home made | ||
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| Schneider’s Drosophila medium | Gibco | 21720-001 | |
| Tipone 1250 μL graduated tip | Starlab | S1161-1820 | |
| Tipone 200 μL bevelled tip | Starlab | S1161-1800 | |
| TrypLE Express Enzyme | Gibco | 12604013 |
Citazione di questo articolo
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).