Drosophila Dissecção da glândula de acessório masculino: um método para isolar células secundárias
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Immarigeon, C., et al. A FACS-based Protocol to Isolate RNA from the Secondary Cells of Drosophila Male Accessory Glands. J. Vis. Exp. (2019).
Este vídeo descreve a dissecação das glândulas acessórias de moscas machos e mostra um exemplo no qual a glândula isolada será dissociada em uma única suspensão celular.
Protocol
Este protocolo é um trecho de Immarigeon et al., Um Protocolo baseado em FACS para isolar o RNA das Células Secundárias das Glândulas Acessórias Masculinas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2019). 1. Soluções e Preparação de Materiais Prepare as seguintes soluções. Prepare o soro suplementar médio (SSM): O meio de Drosophila de Schneider complementado com soro bovino fetal inativado de 10% e 1% penicilina-estrepto…
Materials
| Binocular microscope for dissection | |||
| Binocular with light source for GFP | |||
| Bunsen | |||
| Plastic microtubes 1.5 mL | Eppendorf | ||
| Fine dissection forceps | |||
| Foetal bovine serum | Gibco | 10270-106 | heat inactivated prior to use |
| Glass dishes for dissection | |||
| Ice bucket | |||
| P1000 | Gilson | ||
| P20 | Gilson | ||
| P200 | Gilson | ||
| Papain | 50U/mL stock | ||
| PBS | home made | ||
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| Schneider’s Drosophila medium | Gibco | 21720-001 | |
| Tipone 1250 μL graduated tip | Starlab | S1161-1820 | |
| Tipone 200 μL bevelled tip | Starlab | S1161-1800 | |
| TrypLE Express Enzyme | Gibco | 12604013 |
Citazione di questo articolo
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).