קיבוע אתנול וכתמי DAPI: שיטה לדמיין דנ"א ב- C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: קלארק, E. K., ואח ‘מניפולציה של Ploidy ב Caenorhabditis אלגנס. ג’יי ויס אקספ. (2018).
כאן, אנו מתארים טכניקה המשמשת להמחזת דנ”א גנומי בנמטודות קבועות שלמות. הסרטון כולל פרוטוקול לדוגמה לספירת כרומטין ביציות C. elegans לא מופרות.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך קלארק ואח ‘, מניפולציה של Ploidy ב Caenorhabditis אלגנס, J. Vis. Exp. (2018). זני Tetraploid ניתן לאמת על ידי ספירת מספר הכרומוזומים ביציות שלהם לא מופרית. מיקרוסקופיה פלואורסצנטית יכולה לשמש לסינון מספר זו?…
Materials
| Dissecting Microscope | Motic Microscopy | SMZ171 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Staining | |||
| Hoechst 33258, Pentahydrate | Biotium | 40045 | |
| DAPI | Biotium | 40011 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ethanol Fixation | |||
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP | Koptec, VWR | 89125-166 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| M9 Buffer | |||
| Sodium chloride, Biotechnology Grade | VWR | 97061-278 | |
| Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade | VWR | 97062-346 | |
| Sodium phosphate, monobasic dihydrate | Fisher Scientific | AC271750025 |
Citer Cet Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).