Ethanolfixatie en DAPI-kleuring: een methode om DNA in C. elegans te visualiseren

Published: April 30, 2023

Abstract

Bron: Clarke, E. K., et al. Manipulatie van Ploidy in Caenorhabditis elegans. J.Vis. Exp. (2018).

Hier beschrijven we een techniek die wordt gebruikt om genomisch DNA te visualiseren in vaste, intacte nematoden. De video bevat een voorbeeldprotocol om chromatine te tellen in onbevruchte C. elegans-oöcyten.

Protocol

Dit protocol is een fragment uit Clarke et al, Manipulatie van Ploidy in Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Tetraploïde stammen kunnen worden gevalideerd door het aantal chromosomen in hun onbevruchte oöcyten te tellen. Fluorescerende microscopie kan worden gebruikt om te screenen op het aantal chromosoomparen in onbevruchte diploïde oöcyten (voorafgaand aan …

Materials

Dissecting Microscope Motic Microscopy SMZ171
Name Company Catalog Number Comments
Staining
Hoechst 33258, Pentahydrate Biotium 40045
DAPI Biotium 40011
Name Company Catalog Number Comments
Ethanol Fixation
Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP Koptec, VWR 89125-166
Name Company Catalog Number Comments
M9 Buffer
Sodium chloride, Biotechnology Grade VWR 97061-278
Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade VWR 97062-346
Sodium phosphate, monobasic dihydrate Fisher Scientific AC271750025

Play Video

Citer Cet Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).

View Video