Ethanol-Fixierung und DAPI-Färbung: Eine Methode zur Visualisierung von DNA in C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Clarke, E. K., et al. Manipulation of Ploidy in Caenorhabditis elegans. J. Vis. (2018).
Hier beschreiben wir eine Technik zur Visualisierung genomischer DNA in festen, intakten Nematoden. Das Video enthält ein Beispielprotokoll zur Zählung von Chromatin in unbefruchteten C. elegans Oozyten.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Clarke et al, Manipulation of Ploidy in Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Tetraploide Stämme können validiert werden, indem die Anzahl der Chromosomen in ihren unbefruchteten Oozyten gezählt wird. Fluoreszierende Mikroskopie kann verwendet werden, um die Anzahl der Chromosomenpaare in unbefruchteten diploiden Oozyten (vor d…
Materials
| Dissecting Microscope | Motic Microscopy | SMZ171 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Staining | |||
| Hoechst 33258, Pentahydrate | Biotium | 40045 | |
| DAPI | Biotium | 40011 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ethanol Fixation | |||
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP | Koptec, VWR | 89125-166 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| M9 Buffer | |||
| Sodium chloride, Biotechnology Grade | VWR | 97061-278 | |
| Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade | VWR | 97062-346 | |
| Sodium phosphate, monobasic dihydrate | Fisher Scientific | AC271750025 |
Citer Cet Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).