Alerjik Havayolu Enflamasyon sırasındaki solunum Dendritik Hücre olgunlaşması ve Göç Analizi
Summary
Biz ovalbumin bağlı alerjik hava yolu inflamasyonu ayarı ovalbumin yanıt olarak pulmoner dendritik hücrelerin olgunlaşma ve göç izlemek için bir strateji tanımlamak. Bu strateji, enfeksiyon ayarlarında pulmoner dendritik hücreler göç değerlendirmek için modifiye edilebilir.
Abstract
Dendritik hücreler (DC) antijen-spesifik T hücreleri aktive ederek adaptif immün yanıtın başlatılması dahil anahtar oyuncular vardır. DC'ler kararlı periferik dokularda bulunur, ancak antijen uyarılara yanıt olarak, DC'lerin antijen kadar sürebilir ve hızla 1,2 antijene karşı T hücre yanıtı başlatır lenf düğümlerine göç ederler. Buna ek olarak, dendritik da otoimmün yanı sıra alerjik bağışıklık yanıtı 3 başlatıcı önemli bir rol oynamaktadır.
DC'ler akciğer çevre 4 ortamda hoşgörü immün yanıt ve indüksiyon hem başlamasında önemli bir rol oynamaktadır. Akciğer çevre antijenleri 5 geniş bir dizi maruz kalma nedeniyle, büyük ölçüde tolerogenic olduğunu. Bununla birlikte, bazı kişiler alerji ve astım indüksiyon yol açar toleransı bir ara vardır. Bu çalışmada, hava yolu DC olgunlaşması ve mig izlemek için kullanılabilecek bir strateji tanımlamaksensitizasyon için kullanılan antijene karşı tepki olarak oranı. Havayolu DC olgunlaşma ve göç ölçümü hava yolu allerjik inflamasyon sırasında bağışıklık yanıtının kinetiği değerlendirmesi için olanak sağlar ve ayrıca altta yatan mekanizmalarıyla birlikte izleyen bağışıklık yanıtının büyüklüğünü anlamakta yardımcı olur.
Bizim strateji duyarlaştırıcı ajan olarak ovalbumin kullanımına dayanmaktadır. Ovalbumin bağlı allerjik astım solunum yolu eozinofili, akciğer iltihabı ve astım 6,7 sırasında bulunan yüksek IgE düzeyleri yeniden üretmek için yaygın olarak kullanılan bir modeldir. Sensitizasyon sonra, farelerin alımı ovalbumin havayolu DC'lerin özel etiketleme sağlar FITC etiketli ovalbumin intranazal teslimat, karşı karşıya gelmekte. Sonraki birkaç DC özel işaretlerini kullanarak, bu DC'ler olgunlaşmasını değerlendirmek ve aynı zamanda akış sitometri kullanılarak lenf düğümlerine göç değerlendirebilir.
Protocol
Discussion
Burada sunulan yöntemi havayolu meydan için OVA-FITC teslim dayalı akciğer DC'leri, analiz için bir akış sitometri tabanlı bir yaklaşım sunuyor. Bu OVA-FITC sürebilir ve izlenen bu nedenle DC nüfus, etkili OVA bağlı alerjik hava yolu inflamasyonu sırasında hava yolu bağışıklık yanıtı katılıyor olanlar akciğer DC'leri, seçici izleme sağlar. Kontrolü farelerde, allerjik hava yolu inflamasyonu yokluğunda, MLN tespit göçmen DC'lerin numaraları (OVA-FITC + DC) önemli bir artışl…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma Dr Jim Hu CIHR ve CF Kanada hibe ve CF Kanada tarafından Rahul Kushwah verilen bir Doktora Öğrenciliği tarafından finanse edildi.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Ovalbumin | Sigma-Aldrich | A5503 |
| Alum | Thermo Scientific | 77161 |
| OVA-FITC | Sigma-Aldrich | A9771 |
| Collagenase D | Roche | 11088858001 |
| Antibodies | e-Bioscience |
Referencias
- Kushwah, R., Hu, J. Role of dendritic cells in the induction of regulatory T cells. Cell Biosci. 20, (2011).
- Kushwah, R., Hu, J. Complexity of dendritic cell subsets and their function in the host immune system. Immunology. 133, 409-419 (2011).
- Lambrecht, B. N., Hammad, H. Taking our breath away: dendritic cells in the pathogenesis of asthma. Nat Rev Immunol. 3, 994-1003 (2003).
- Hammad, H., Lambrecht, B. N. Dendritic cells and epithelial cells: linking innate and adaptive immunity in asthma. Nat. Rev. Immunol. 8, 193-204 (2008).
- Lloyd, C. M., Murdoch, J. R. Tolerizing allergic responses in the lung. Mucosal. Immunol. 3, 334-344 (2010).
- Herz, U. The relevance of murine animal models to study the development of allergic bronchial asthma. Immunol. Cell Biol. 74, 209-217 (1038).
- Herz, U., Lumpp, U., Daser, A., Gelfand, E. W., Renz, H. Murine animal models to study the central role of T cells in immediate-type hypersensitivity responses. Adv. Exp. Med. Biol. 409, 25-32 (1996).
- Nakae, S. TNF can contribute to multiple features of ovalbumin-induced allergic inflammation of the airways in mice. J. Allergy Clin. Immunol. 119, 680-686 (2007).
- Guth, A. M. Lung environment determines unique phenotype of alveolar macrophages. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 296, L936-L946 (2009).
- Kushwah, R., Cao, H., Hu, J. Characterization of pulmonary T cell response to helper-dependent adenoviral vectors following intranasal delivery. J. Immunol. 180, 4098-4108 (2008).
- Kushwah, R., Oliver, J. R., Zhang, J., Siminovitch, K. A., Hu, J. Apoptotic dendritic cells induce tolerance in mice through suppression of dendritic cell maturation and induction of antigen-specific regulatory T cells. J. Immunol. 183, 7104-7118 (2009).
