Analyse der Lungen-Reifung von dendritischen Zellen und Migration während der allergischen Atemwegsentzündung
Summary
Wir beschreiben eine Strategie zur Reifung und Migration der pulmonalen dendritischen Zellen als Reaktion auf Ovalbumin in der Einstellung von Eieralbumin allergischen Entzündung der Atemwege zu überwachen. Diese Strategie kann modifiziert werden, um die Migration der pulmonalen dendritischen Zellen in den Einstellungen der Infektion herangezogen werden.
Abstract
Dendritische Zellen (DCs) sind die Hauptakteure bei der Initiation der adaptiven Immunantwort durch Aktivierung Antigen-spezifischen T-Zellen beteiligt. DCs vorhanden sind, in den peripheren Geweben im eingeschwungenen Zustand, aber als Reaktion auf Antigen-Stimulation, nehmen DCs das Antigen und wandern schnell zu den Lymphknoten, wo sie initiieren T-Zell-Antwort gegen das Antigen 1,2. Zusätzlich DCs spielen auch eine entscheidende Rolle bei der Initiierung Autoimmun sowie allergische Immunantwort 3.
DCs spielen eine wesentliche Rolle sowohl in der Initiierung der Immunantwort und die Induktion einer Toleranz in der Einstellung der Lunge Umwelt 4. Lung Umgebung weitgehend tolerogene aufgrund der Exposition gegenüber Vielzahl von Umweltantigene 5. Doch bei einigen Personen gibt es eine Pause in der Toleranz, die zur Induktion von Allergien und Asthma führt. In dieser Studie beschreiben wir eine Strategie, die zur Reifung und Atemwege DC MIG überwacht werden könnenRation in Reaktion auf das Antigen zur Sensibilisierung verwendet. Die Messung der Atemwege Reifung und Migration ermöglicht die Beurteilung der Kinetik der Immunantwort bei allergischen Entzündung der Atemwege und hilft beim Verständnis der Größe der nachfolgende Immunreaktion zusammen mit den zugrunde liegenden Mechanismen.
Unsere Strategie basiert auf der Verwendung von Ovalbumin als Sensibilisierungsmittel bezogen. Ovalbumin-allergischen Asthma ist eine weit verbreitete Modell, um die Lungeneosinophilie, Lungenentzündung und erhöhte IgE-Spiegel bei Asthma 6,7 vor reproduzieren. Nach Sensibilisierung werden die Mäuse durch intranasale Verabreichung von FITC-markierten Ovalbumin, die zur spezifischen Markierung von Atemwegs-DCs, welche die Aufnahme ermöglicht Ovalbumin herausgefordert. Als nächstes mit mehreren DC-spezifische Marker, können wir beurteilen, die Reifung der DC und kann auch beurteilen, ihre Wanderung zu den Lymphknoten durch den Einsatz der Durchflusszytometrie.
Protocol
Discussion
Die hier vorgestellte Methode bietet eine Durchflusszytometrie basierenden Ansatz für die Analyse von Lungen-DCs, bei Lieferung von OVA-FITC zur Sicherung der Atemwege Herausforderung basiert. Dies ermöglicht eine selektive Abfrage der pulmonalen DCs, die bis zu OVA-FITC und damit die DC-Populationen, die überwacht werden, sind diejenigen, die effektiv in den Atemwegen Immunantwort beteiligt sind im Verlauf der OVA-induzierten allergischen Entzündung der Atemwege. In Kontroll-Mäusen, in Abwesenheit von allergischen…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde von CIHR und CF Kanada Stipendien an Dr. Jim Hu und durch ein Doktoranden-Stipendium vergeben, um Rahul Kushwah von CF Kanada finanziert.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Ovalbumin | Sigma-Aldrich | A5503 |
| Alum | Thermo Scientific | 77161 |
| OVA-FITC | Sigma-Aldrich | A9771 |
| Collagenase D | Roche | 11088858001 |
| Antibodies | e-Bioscience |
Referencias
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