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ヒト単球由来マクロファージにおける炎症性カスパーゼ誘導近接の可視化
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JoVE 杂志 免疫与感染
Visualization of Inflammatory Caspases Induced Proximity in Human Monocyte-Derived Macrophages
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ヒト単球由来マクロファージにおける炎症性カスパーゼ誘導近接の可視化

DOI:
10.3791/63162-v

•

08:41 min

•

April 06, 2022

•

,
1Department of Pediatrics, Division of Hematology-Oncology, Department of Molecular and Cellular Biology, Texas Children’s Hospital William T. Shearer Center for Human Immunobiology,Baylor College of Medicine

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:51Preparation of Cells for Electroporation
  • 02:11Nucleofection of Caspase BiFC Components into Human Monocyte-Derived Macrophages
  • 04:41Treatment of Transfected MDM and Caspase BiFC Data Acquisition
  • 06:37Results: Differentiation of CD14-Monocytes and Transfection of Human Monocyte-Derived Macrophages
  • 08:12Conclusion

Summary

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このプロトコルは、ヒト血液サンプルから単球由来マクロファージ(MDM)を取得するワークフロー、細胞の生存率と挙動を損なうことなく炎症性カスパーゼ二分子蛍光相補(BiFC)レポーターをヒトMDMに効率的に導入する簡単な方法、および生細胞における炎症性カスパーゼ活性化を測定するためのイメージングベースのアプローチを記述しています。

Tags

Inflammatory CaspasesProximityHuman Monocyte-derived MacrophagesVisualizationMolecular-levelPrimary Immune CellsOligomerizationMicroscopic MethodologiesTrypsin-EDTAPBSCell NumberHemocytometerReporter PlasmidCaspase BiFC PlasmidsNucleofectionElectroporation

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