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Visualisierung von entzündlichen Kaspasen induzierter Nähe in humanen Monozyten-abgeleiteten Makrophagen
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Visualization of Inflammatory Caspases Induced Proximity in Human Monocyte-Derived Macrophages
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Visualisierung von entzündlichen Kaspasen induzierter Nähe in humanen Monozyten-abgeleiteten Makrophagen

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•

08:41 min

•

April 06, 2022

DOI:

10.3791/63162-v

DOI:
10.3791/63162-v

•

08:41 min
April 06, 2022

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4 Views
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1Department of Pediatrics, Division of Hematology-Oncology, Department of Molecular and Cellular Biology, Texas Children’s Hospital William T. Shearer Center for Human Immunobiology,Baylor College of Medicine

Summary

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Dieses Protokoll beschreibt den Arbeitsablauf zur Gewinnung von Monozyten-abgeleiteten Makrophagen (MDM) aus menschlichen Blutproben, eine einfache Methode zur effizienten Einführung von BiFC-Reportern (Bimolecular Fluorescence Complementation) in das menschliche MDM, ohne die Lebensfähigkeit und das Verhalten der Zellen zu beeinträchtigen, und einen bildgebenden Ansatz zur Messung der entzündlichen Caspase-Aktivierung in lebenden Zellen.

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Inflammatory CaspasesProximityHuman Monocyte-derived MacrophagesVisualizationMolecular-levelPrimary Immune CellsOligomerizationMicroscopic MethodologiesTrypsin-EDTAPBSCell NumberHemocytometerReporter PlasmidCaspase BiFC PlasmidsNucleofectionElectroporation

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Bolívar, B. E., Bouchier-Hayes, L. Visualization of Inflammatory Caspases Induced Proximity in Human Monocyte-Derived Macrophages. J. Vis. Exp. (182), e63162, doi:10.3791/63162 (2022).

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