Summary

Дю-прижигание на мышиной модели анкилозирующего спондилоартрита

Published: October 27, 2023
doi:

Summary

В данной работе подробно описаны операционные процедуры и меры предосторожности, которые необходимо предпринять во время прижигания ду-оксисессора при лечении анкилозирующего спондилоартрита у подопытных мышей.

Abstract

Анкилозирующий спондилит (АС) – это прогрессирующая и инвалидизирующая форма артрита, которая в первую очередь поражает осевой скелет. Это заболевание в основном поражает позвоночник и крестцово-подвздошный сочленение. Сращение позвоночника и крестцово-подвздошного сочленения может произойти на поздней стадии заболевания, что приводит к тугоподвижности позвоночника и кифозу, а также затруднению ходьбы, что серьезно сказывается на качестве работы и повседневной деятельности и накладывает тяжелую нагрузку на пациента, семью и общество. Все большее внимание уделяется немедикаментозной терапии как альтернативной терапии АС. Прижигание – это древняя терапевтическая техника, используемая в традиционной китайской медицине (ТКМ). Дю-прижигательная терапия, уникальное и инновационное наружное лечение, разработанное на основе обычного прижигания, оказывает определенное терапевтическое воздействие на АС. Дю-прижигание умело сочетает в себе совместимые методы ТКМ для интеграции меридианов, акупунктурных точек, китайской фитотерапии и прижигания. В данной работе подробно описаны операционные процедуры и меры предосторожности, которые необходимо предпринять во время прижигания ду-коксесоса у подопытных мышей, чтобы обеспечить экспериментальную основу для изучения механизма прижигания ду-оксижига при лечении АС.

Introduction

Анкилозирующий спондилит (АС) – это прогрессирующая и инвалидизирующая форма артрита, которая в первую очередь поражает осевой скелет. Согласно последнему эпидемиологическому исследованию, ~0,01%-1,8% людей в мире страдаютэтим состоянием1, большинство из которых молодые мужчины (соотношение мужчин и женщин ~2-3:1)2. Заболеваемость АС в китайской популяции составляет 0,2%-0,4%. Это заболевание в основном поражает позвоночник и крестцово-подвздошный сочленение. Спондилодез позвоночника и крестцово-подвздошного сочленения может произойти на поздних стадиях заболевания, что приводит к тугоподвижности позвоночника и кифозу, а также затруднению ходьбы, что серьезно влияет на качество работы и повседневной деятельности и ложится тяжелым бременем на пациента, семью и общество1. В настоящее время не существует окончательного решения проблемы АС, и предлагаемые методы лечения, как фармакологические, так и нефармакологические, в первую очередь направлены на облегчение боли, замедление прогрессирования заболевания и улучшение качества жизни. В последние годы, в связи с тем, что фармакотерапевтические возможности былиочень ограничены, все большее внимание уделяется нефармакотерапии, которая стала альтернативной терапией АС. В Китае пациенты часто предпочитают наружное лечение, состоящее из традиционной китайской медицины (ТКМ), которое имеет незначительные побочные эффекты и большое удобство во время лечения.

Прижигание – это древняя терапевтическая техника, используемая в ТКМ. Дю-прижигание – это техника наружного лечения, состоящая из «лечебного прижигания с пеной» на сегменте позвоночника меридиана Дю. Он в основном используется при лечении АС и показал свою безопасность и эффективность. По сравнению с обычным прижиганием, Du-прижигание имеет характеристики широкой площади прижигания, большого конуса моксы, сильной огневой мощи и высокой температуры4. Систематический обзор и мета-анализ свидетельствуют о том, что прижигание является эффективным дополнительным лечением АС5. Недавнее исследование подтвердило, что клинические симптомы и некоторые воспалительные факторы у пациентов с синдромом Аспергера были улучшены с помощью прижигания6. Исследования показали, что Du-прижигание может увеличивать содержание в мозге β-эндорфина и оказывать центральное обезболивающее действие7, подавлять экспрессию гена HLA-B27 8 и задерживать частоту рецидивов АС. Дю-прижигание также оказывает улучшающее действие на прогрессирование АС, снижая воспалительный индекс СОЭ (СОЭ) и уровни С-реактивного белка (СРБ), С-концевого пептида коллагена I типа (CTX-I) и белка Dickkopf1 (DKK1)9,10.

Другое клиническое исследование показало, что Du-moxiburnion может дополнительно регулировать неупорядоченные субпопуляции Т-клеток, Ig и комплемент C3 для балансировки иммунногомеханизма. С точки зрения метаболизма костной ткани, прижигание может ингибировать повышение уровня щелочной фосфатазы (ЩФ) и фосфора в сыворотке крови (S-P), повышения уровня кальция в сыворотке крови (S-Ca), минеральной плотности костной ткани (МПК) и прочности костей12. Кроме того, Du-прижигание может восстанавливать функцию позвоночника в нескольких точках, чтобы облегчить симптомы усталости у пациентов с синдромом Аспергера13. Некоторые исследования на животных выявили потенциальный механизм прижигания при лечении АС. Исследование показало, что прижигание значительно улучшило общее состояние здоровья, уменьшило уровень толщины лапы и снизило уровни IL-1β, PGE2, IL-6 и TNF-α в образцах ткани связок позвоночника. Анализ метаболических путей связал идентифицированные метаболиты с циклом ТСА, а также с липидным, аминокислотным, кишечной флорой и пуриновым метаболизмом14. Другое исследование показало, что прижигание подавляет экспрессию провоспалительных цитокинов, IL-1β, TNF-α, IL-17 и IL-6; снижение уровней мРНК RANKL, RANK, ALP и OCN; и улучшили гистопатологические признаки у мышей с синдромом Аспергера15.

Хотя эти исследования показывают, что прижигание может быть эффективным при лечении АС, необходимы дополнительные исследования, чтобы подтвердить эти результаты и определить оптимальный протокол лечения прижигания у пациентов с АС. Наша команда создала и модифицировала прижигание, основанное на базовой теории и практическом действии традиционного китайского прижигания, которое широко проводится и применяется в китайской клинической практике уже более 35 лет. Несмотря на то, что существует мало высококачественных исследований по лечению АС с помощью Du-moxiburnion, его показания к лечению АС подтверждены доказательствами. Однако механизм лечения АС с помощью Du-прижигания заслуживает дальнейшего изучения. Исследование на животных является важным методом изучения механизма Du-прижигания при лечении АС. Клиническое действие Du-прижигания является относительно зрелым, но редко используется при изучении механизма в экспериментах на животных. В данной работе подробно описана операция и меры предосторожности, которые необходимо предпринять во время Du-прижигания при лечении экспериментальных мышей с АС.

Protocol

Все эксперименты на животных были одобрены Комитетом по этике благополучия экспериментальных животных Шаньдунского университета традиционной китайской медицины (No. SDUTCM20230831301). 1. Подготовка животных Заранее определите экспериментальные группы и количес?…

Representative Results

У модельных мышей, индуцированных ПГ, развились симптомы периферического артрита, характеризующиеся покраснением и отеком конечностей и пальцев ног, и постепенно развился аксиальный артрит уже на 14-й неделе, который очень похож на проявление АС. Таким образом, мышиная модель АС считал?…

Discussion

Клинически АС проявляется в виде отека спины, поясницы и суставов, а в тяжелых случаях может возникать деформация позвоночника и ригидность суставов26. Ранняя диагностика и лечение могут улучшить качество жизни, снизить показатели инвалидности и улучшить прогнозы пациент?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Эта работа была поддержана Общей программой Национального фонда естественных наук Китая (No 82174491) и Академической школой наследования Школы традиционной китайской медицины Цилу (No 82174491). Лу Вэйхань [2020]132). Спасибо Центру лабораторных животных Шаньдунского университета традиционной китайской медицины за предоставление нам экспериментальных условий.

Materials

10% EDTA Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China
alcohol pads HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China
anesthesia machine Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK
centrifuge tubes Axygen, Corning, NewYork, UAS
complete Frech's adjuvant (CFA) aladdin,Shanghai, China F393378
cotton ball Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cotton gauze Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cutting board self-preparation
decorin from bovine articular cartilage Sigma-Aldrich, MO, USA D8428
depilatory cream Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China
electronic scale Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China
Eppendorf tube Axygen, Corning, NewYork, UAS
eye lubricant Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China
ginger self-preparation
GraphPad Prism 7 software GraphPad Software,Boston, USA
hair clipper Super human Group CO LTD, Jinhua, China
heating pads Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China
incomplete Freund’s adjuvant (IFA) aladdin,Shanghai, China F393371
injection syringe Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China
isoflurane Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China R510-22-10
joss stick Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China
juicer Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China
knife self-preparation
lighter Zhejiang tiger-lighter Co. LTD
mortar Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China
Mouse IL-17 ELISA Kit absin, Shanghai, China abs520009-96T
Mouse TNF-α ELISA Kit Wuhan Sanying, Wuhan, China KE10002
mulberry paper Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China
OFT Xinruan,Shanghai, China XR-XZ301
paper cup self-preparation
pipettes OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK
refined moxa velvet self-preparation
rotarod Xinruan,Shanghai, China XR-6C
scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD
scissors Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China
semi-automatic paraffin sectioning machine Leica Camera AG, Watznach, Germany
SPSS 25.0 software International Business Machines Corporation, NewYork, UAS
TCM powder self-preparation
tips Biosharp, Labgic, Beijing, China
writing brush Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China

References

  1. Sieper, J., Poddubnyy, D. Axial spondyloarthritis. Lancet. 390 (10089), 73-84 (2017).
  2. Lee, W., Reveille, J. D., Weisman, M. H. Women with ankylosing spondylitis: a review. Arthritis Rheum. 59 (3), 449-454 (2008).
  3. Sari, &. #. 3. 0. 4. ;., Öztürk, M. A., Akkoç, N. N. of ankylosing spondylitis. Turk J Med Sci. 45 (2), 416-430 (2015).
  4. Zhang, L., et al. Governor vessel moxibustion: Ancient Chinese medical technology with new vitality. Chin J Integr Med. 23 (5), 396-400 (2017).
  5. Hu, J., et al. Moxibustion for the treatment of ankylosing spondylitis: a systematic review and meta-analysis. Ann Palliat Med. 9 (3), 709-720 (2020).
  6. Liu, Y., Wang, P., Sun, Y. Y., Qu, J., Li, M. Efficacy of thunder-fire moxibustion in treating ankylosing spondylitis of kidney deficiency and governor meridian cold and its influence on TNF-α and RANKL: study protocol for a prospective, nonblinded, single-center, randomized controlled trial. Trials. 23 (1), 344 (2022).
  7. Chong, G. Q., Ma, Y., Sun, H. S., Zhang, T., Peng, W. Study on clinical and analgesic mechanism of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. J Clin Acupunct Moxib. (06), 48-49 (1999).
  8. Liu, W. Q., Lu, X. H. Clinical observation of Melilotus extract tablets combined with Dujiu for treating ankylosing spondylitis. Pharm Res. 35 (03), 182-184 (2016).
  9. Zhang, Y. L., Lin, J. H., Zhou, Y. Y., Zhao, G. Q., He, Y. T. Clinical observation of Bushen Qiangdu Zhilou decoction combined Du-moxibustion in treating ankylosing spondylitis. Chin J Exp Tradit Med Formulae. 21 (10), 190-194 (2015).
  10. Guo, L. J., et al. Clinical effect of moxibustion at governor vessel combined with Bushen Quhan Huashi prescription for ankylosing spondylitis and its effect on levels of CTX-I and DKK1 in serum. New Chin Med. 53 (10), 117-121 (2021).
  11. Deng, Y. X. Governor moxibustion treatment of ankylosing spondylitis the adjustment of the T-cell subsets observed. J Practical Tradi Chin Inter Med. 26 (18), 77-78 (2012).
  12. Wang, Y. Q. Mechanism of exercise combined with moxibustion in the treatment of osteoporosis in castrated rats. Chin J Gerontol. 37 (04), 839-840 (2017).
  13. Ren, J. Y., Li, F., Yan, J., Wan, C., Cai, L. Clinical study of Du-moxibustion combined with needling Huatuo Jiaji acupoint in the treatment of AS of kidney-Yang deficiency. J Clin Acupunct Moxib. 35 (06), 41-44 (2019).
  14. Xu, X., et al. Metabolomic analysis of biochemical changes in the tissue and urine of proteoglycan-induced spondylitis in mice after treatment with moxibustion. Integr Med Res. 10 (1), 100428 (2021).
  15. Xu, X., et al. Moxibustion attenuates inflammation and alleviates axial spondyloarthritis in mice: Possible role of APOE in the inhibition of the Wnt pathway. J Tradit Complement Med. 12 (5), 518-528 (2022).
  16. Li, X., et al. Inflammation intensity-dependent expression of osteoinductive wnt proteins is critical for ectopic new bone formation in ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 70, 1056-1070 (2018).
  17. Cui, H., et al. CXCL12/CXCR4-Rac1-mediated migration of osteogenic precursor cells contributes to pathological new bone formation in ankylosing spondylitis. Sci Adv. 8 (14), eabl8054 (2022).
  18. Braem, K., Lories, R. J. Insights into the pathophysiology of ankylosing spondylitis: contributions from animal models. Joint Bone Spine. 79 (3), 243-248 (2012).
  19. Mikecz, K., Glant, T. T., Poole, A. R. Immunity to cartilage proteoglycans in BALB/c mice with progressive polyarthritis and ankylosing spondylitis induced by injection of human cartilage proteoglycan. Arthritis Rheum. 30, 306-318 (1987).
  20. Li, Z., et al. Tenascin-C-mediated suppression of extracellular matrix adhesion force promotes entheseal new bone formation through activation of Hippo signalling in ankylosing spondylitis. Ann Rheum Dis. 80 (7), 891-902 (2021).
  21. Glant, T. T., Cs-Szabo´, G., Nagase, H., Jacobs, J. J., Mikecz, K. Progressive polyarthritis induced in BALB/c mice by aggrecan from human osteoarthritis cartilage. Arthritis Rheum. 41, 1007-1018 (1998).
  22. Hu, B., Li, Y., Tan, J. Research progress of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. Rheum & Arthritis. 11 (05), 77-80 (2022).
  23. Yang, Y., Dong, Q., Li, R. Matrine induces the apoptosis of fibroblast-like synoviocytes derived from rats with collagen-induced arthritis by suppressing the activation of the JAK/STAT signaling pathway. Int J Mol Med. 39 (2), 307-316 (2017).
  24. Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. J Neurosci Methods. 189 (2), 180-185 (2010).
  25. Liu, P., et al. A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis. J Orthop Surg Res. 16 (1), 541 (2021).
  26. Taurog, J. D., Chhabra, A., Colbert, R. A. Ankylosing spondylitis and axial spondyloarthritis. N. Engl. J. Med. 374, 2563-2574 (2016).
  27. Schett, G., et al. Enthesitis: From pathophysiology to treatment. Nat. Rev. Rheumatol. 13, 731-741 (2017).
  28. Duan, W. X., et al. Effect of different concentrations of Moxa-smoke on lung function and TNF-α and IL-1 β levels in serum and lung tissues in normal rats. Zhen Ci Yan Jiu [Acupuncture Research]. 43 (2), 98-103 (2018).
  29. Callhoff, J., Sieper, J., Weiß, A., Zink, A., Listing, J. Efficacy of TNFα blockers in patients with ankylosing spondylitis and non-radiographic axial spondyloarthritis: a meta-analysis. Ann Rheum Dis. 74 (6), 1241-1248 (2015).
  30. Schinocca, C., et al. Role of the IL-23/IL-17 pathway in rheumatic diseases: an overview. Front Immunol. 12, 637829 (2021).
  31. Gravallese, E. M., Schett, G. Effects of the IL-23-IL-17 pathway on bone in spondyloarthritis. Nat Rev Rheumatol. 14 (11), 631-640 (2018).
  32. Kenna, T. J., et al. Enrichment of circulating interleukin-17-secreting interleukin-23 receptor-positive γ/δ T cells in patients with active ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 64 (5), 1420-1429 (2012).
  33. Poddubnyy, D., Sieper, J. Treatment of axial spondyloarthritis: what does the future hold. Curr Rheumatol Rep. 22 (9), 47 (2020).
  34. van der, H. D., et al. Ixekizumab, an interleukin-17A antagonist in the treatment of ankylosing spondylitis or radiographic axial spondyloarthritis in patients previously untreated with biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (COAST-V): 16 week results of a phase 3 randomised, double-blind, active-controlled and placebo-controlled. Lancet. 392 (10163), 2441-2451 (2018).
  35. Fu, Y. S., et al. Pharmacological properties and underlying mechanisms of curcumin and prospects in medicinal potential. Biomed Pharmacother. 141, 111888 (2021).
  36. Hassan, A. S., Hofni, A., Abourehab, M. A. S., Abdel-Rahman, I. A. M. Ginger extract-loaded transethosomes for effective transdermal permeation and anti-inflammation in rat model. Int J Nanomedicine. 18, 1259-1280 (2023).

Play Video

Cite This Article
Yu, W., Li, X., Jia, Z., Hou, Y., Dong, T., Wang, X., Liu, Y., Yang, J. Du-Moxibustion in a Mouse Model of Ankylosing Spondylitis. J. Vis. Exp. (200), e65586, doi:10.3791/65586 (2023).

View Video