Summary

Du-moxibustione in un modello murino di spondilite anchilosante

Published: October 27, 2023
doi:

Summary

Questo documento descrive in dettaglio le procedure operative e le precauzioni da prendere durante la Du-moxibustione nel trattamento della spondilite anchilosante nei topi da esperimento.

Abstract

La spondilite anchilosante (AS) è una forma di artrite progressivamente peggiorante e invalidante che colpisce principalmente lo scheletro assiale. Questa malattia coinvolge principalmente la colonna vertebrale e l’articolazione sacroiliaca. La fusione della colonna vertebrale e dell’articolazione sacroiliaca può verificarsi nella fase successiva della malattia, con conseguente rigidità spinale e cifosi, nonché difficoltà a camminare, che influisce seriamente sulla qualità del lavoro e delle attività quotidiane e impone un pesante fardello al paziente, alla famiglia e alla società. Una crescente attenzione è stata rivolta alla non-farmacoterapia come terapia alternativa per la SA. La moxibustione è un’antica tecnica terapeutica utilizzata nella Medicina Tradizionale Cinese (MTC). La terapia della du-moxibustione, un trattamento esterno unico e innovativo sviluppato sulla base della moxibustione ordinaria, ha un effetto terapeutico definito sulla SA. La du-moxibustione combina abilmente le tecniche compatibili della MTC per integrare meridiani, agopunti, fitoterapia cinese e moxibustione. Questo articolo descrive in dettaglio le procedure operative e le precauzioni da prendere durante la Du-moxibustione nei topi sperimentali per fornire una base sperimentale per lo studio del meccanismo della Du-moxibustione nel trattamento della SA.

Introduction

La spondilite anchilosante (AS) è una forma di artrite progressivamente peggiorante e invalidante che colpisce principalmente lo scheletro assiale. Secondo l’ultima indagine epidemiologica, ~0,01%-1,8% delle persone nel mondo soffre di questa condizione1, la maggior parte dei quali sono giovani maschi (il rapporto maschi/femmine è ~2-3:1)2. L’incidenza della SA nella popolazione cinese è dello 0,2%-0,4%. Questa malattia coinvolge principalmente la colonna vertebrale e l’articolazione sacroiliaca. La fusione della colonna vertebrale e dell’articolazione sacroiliaca può verificarsi nelle fasi successive della malattia, con conseguente rigidità spinale e cifosi, nonché difficoltà a camminare, che influisce seriamente sulla qualità del lavoro e delle attività della vita quotidiana e impone un pesante onere al paziente, alla famiglia e alla società1. Attualmente, non esiste una soluzione definitiva per la SA e i trattamenti forniti, sia farmacologici che non farmacologici, si concentrano principalmente sull’alleviare il dolore, rallentare la progressione della malattia e migliorare la qualità della vita. Negli ultimi anni, poiché le opzioni farmacoterapeutiche sono state molto limitate3, è stata prestata una crescente attenzione alla non farmacoterapia, che è diventata una terapia alternativa per la SA. In Cina, i pazienti spesso preferiscono un trattamento esterno costituito dalla Medicina Tradizionale Cinese (MTC), che ha effetti collaterali minori e una grande comodità durante il trattamento.

La moxibustione è un’antica tecnica terapeutica utilizzata nella MTC. La du-moxibustione è una tecnica di trattamento esterno che consiste in una “moxibustione medicata con schiuma” sul segmento della colonna vertebrale del meridiano Du. Viene utilizzato principalmente nel trattamento della SA e ha dimostrato sicurezza ed efficacia. Rispetto alla moxibustione ordinaria, la Du-moxibustione ha le caratteristiche di un’ampia area di moxibustione, un grande cono di moxa, una forte potenza di fuoco e un’alta temperatura4. Una revisione sistematica e una meta-analisi suggeriscono che la moxibustione è un trattamento complementare efficace per l’AS5. Uno studio recente ha confermato che i sintomi clinici e alcuni fattori infiammatori dei pazienti con SA sono stati migliorati dalla moxibustione6. Gli studi hanno rivelato che la du-moxibustione può aumentare il contenuto cerebrale di β-endorfine ed esercitare un effetto analgesico centrale7, sottoregolare l’espressione del gene HLA-B27 8 e ritardare il tasso di recidiva di AS. La du-moxibustione ha anche un effetto migliorativo sulla progressione della SA diminuendo l’indice infiammatorio VES (VES) e i livelli di proteina C-reattiva (CRP), peptide C-terminale del collagene di tipo I (CTX-I) e proteina Dickkopf1 (DKK1)9,10.

Un altro studio clinico ha dimostrato che la du-moxibustione può regolare ulteriormente i sottoinsiemi di cellule T disordinate, Ig e C3 del complemento per bilanciare il meccanismo immunitario11. In termini di metabolismo osseo, la moxibustione può inibire l’aumento della fosfatasi alcalina sierica (ALP) e del fosforo sierico (S-P), aumentare il calcio sierico (S-Ca), la densità minerale ossea (BMD) e la resistenza ossea12. Inoltre, la du-moxibustione può riparare la funzione spinale in più punti per alleviare i sintomi di affaticamento nei pazienti con SA13. Alcuni studi sugli animali hanno rivelato il potenziale meccanismo della moxibustione nel trattamento della SA. Uno studio ha indicato che la moxibustione ha migliorato significativamente lo stato di salute generale, ha ridotto i livelli di spessore della zampa e ha diminuito i livelli di IL-1β, PGE2, IL-6 e TNF-α nei campioni di tessuto legamentoso della colonna vertebrale. L’analisi della via metabolica ha collegato i metaboliti identificati al ciclo del TCA, nonché al metabolismo dei lipidi, degli aminoacidi, della flora intestinale e delle purine14. Un altro studio ha dimostrato che la moxibustione sopprime l’espressione di citochine pro-infiammatorie, IL-1β, TNF-α, IL-17 e IL-6; riduzione dei livelli di mRNA di RANKL, RANK, ALP e OCN; e migliorato le caratteristiche istopatologiche nei topi AS15.

Sebbene questi studi suggeriscano che la moxibustione possa essere efficace nel trattamento della SA, sono necessarie ulteriori ricerche per confermare questi risultati e determinare il protocollo di trattamento ottimale per la moxibustione nei pazienti con AS. Il nostro team ha creato e modificato la terapia di moxibustione basata sulla teoria di base e sul funzionamento pratico della moxibustione tradizionale cinese, che è stata ampiamente eseguita e applicata nella pratica clinica cinese per oltre 35 anni. Sebbene esistano pochi studi di alta qualità sul trattamento della SA mediante Du-moxibustione, la sua indicazione nel trattamento della SA è stata supportata da prove. Tuttavia, il meccanismo di trattamento della SA con Du-moxibustione merita ulteriori studi. Lo studio sugli animali è un metodo importante per esplorare il meccanismo della Du-moxibustione nel trattamento della SA. Il funzionamento clinico della Du-moxibustione è relativamente maturo, ma raramente utilizzato nello studio del meccanismo negli esperimenti sugli animali. Questo articolo descrive in dettaglio il funzionamento e le precauzioni da prendere durante la du-moxibustione nel trattamento di topi sperimentali con SA.

Protocol

Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati approvati dal Comitato di Revisione Etica del Benessere Animale Sperimentale dell’Università di Medicina Tradizionale Cinese dello Shandong (n. SDUTCM20230831301). 1. Preparazione dell’animale Determinare in anticipo i gruppi sperimentali e il numero di animali per gruppo. Scegliere topi maschi BALb/c, alloggiarli a una temperatura costante di 22 ± 1 °C, un’umidità costante del 60 ± 5% e un ambiente legger…

Representative Results

I topi modello indotti da PG hanno sviluppato sintomi di artrite periferica, caratterizzata da arrossamento e gonfiore delle estremità e delle dita dei piedi, e hanno gradualmente sviluppato l’artrite assiale già alla settimana 14, che è molto simile alla manifestazione dell’AS. Pertanto, il modello murino AS è stato considerato efficace se l’indice di artrite (AI) era superiore a 3 punti a 14 settimane dopo l’ultima iniezione22. Quando le zampe dei topi apparivano gonfie, il trattamento Du-mo…

Discussion

La SA si manifesta clinicamente con dolore alla schiena, lombare e articolare e nei casi più gravi possono verificarsi deformità della colonna vertebrale e rigidità articolare26. La diagnosi e il trattamento precoci possono migliorare la qualità della vita, ridurre i tassi di disabilità e migliorare la prognosi dei pazienti con AS. Secondo la medicina tradizionale cinese (MTC), si ritiene che la SA sia causata da una carenza di Yang nel rene e nel meridiano Du, nonché da un accumulo di male …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo lavoro è stato sostenuto dal Programma Generale della Fondazione Nazionale di Scienze Naturali della Cina (No.82174491) e dalla Qilu School of Traditional Chinese Medicine Academic School Inheritance Project (No. Lu Weihan [2020]132). Grazie al Laboratory Animal Center dell’Università di Medicina Tradizionale Cinese dello Shandong per averci fornito le condizioni sperimentali.

Materials

10% EDTA Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China
alcohol pads HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China
anesthesia machine Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK
centrifuge tubes Axygen, Corning, NewYork, UAS
complete Frech's adjuvant (CFA) aladdin,Shanghai, China F393378
cotton ball Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cotton gauze Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cutting board self-preparation
decorin from bovine articular cartilage Sigma-Aldrich, MO, USA D8428
depilatory cream Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China
electronic scale Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China
Eppendorf tube Axygen, Corning, NewYork, UAS
eye lubricant Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China
ginger self-preparation
GraphPad Prism 7 software GraphPad Software,Boston, USA
hair clipper Super human Group CO LTD, Jinhua, China
heating pads Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China
incomplete Freund’s adjuvant (IFA) aladdin,Shanghai, China F393371
injection syringe Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China
isoflurane Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China R510-22-10
joss stick Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China
juicer Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China
knife self-preparation
lighter Zhejiang tiger-lighter Co. LTD
mortar Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China
Mouse IL-17 ELISA Kit absin, Shanghai, China abs520009-96T
Mouse TNF-α ELISA Kit Wuhan Sanying, Wuhan, China KE10002
mulberry paper Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China
OFT Xinruan,Shanghai, China XR-XZ301
paper cup self-preparation
pipettes OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK
refined moxa velvet self-preparation
rotarod Xinruan,Shanghai, China XR-6C
scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD
scissors Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China
semi-automatic paraffin sectioning machine Leica Camera AG, Watznach, Germany
SPSS 25.0 software International Business Machines Corporation, NewYork, UAS
TCM powder self-preparation
tips Biosharp, Labgic, Beijing, China
writing brush Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China

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Yu, W., Li, X., Jia, Z., Hou, Y., Dong, T., Wang, X., Liu, Y., Yang, J. Du-Moxibustion in a Mouse Model of Ankylosing Spondylitis. J. Vis. Exp. (200), e65586, doi:10.3791/65586 (2023).

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