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Editing del genoma CRISPR-Cas9 di embrioni di ratto utilizzando il virus adeno-associato (AAV) e l'elettroporazione di embrioni a 2 cellule
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JoVE Journal Genetics
CRISPR-Cas9 Genome Editing of Rat Embryos using Adeno-Associated Virus (AAV) and 2-Cell Embryo Electroporation
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Editing del genoma CRISPR-Cas9 di embrioni di ratto utilizzando il virus adeno-associato (AAV) e l'elettroporazione di embrioni a 2 cellule

italiano

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08:24 min

•

March 15, 2024

DOI:

10.3791/66069-v

DOI:
10.3791/66069-v

•

08:24 min
March 15, 2024

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1Animal Modeling Core,University of Missouri, 2Comparative Medicine Program,University of Missouri, 3Rat Resource and Research Center,University of Missouri, 4Department of Veterinary Pathobiology,University of Missouri

Summary

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Questo protocollo presenta un approccio ottimizzato per la produzione di modelli di ratto geneticamente modificati. Il virus adeno-associato (AAV) viene utilizzato per fornire un modello di riparazione del DNA e l'elettroporazione viene utilizzata per fornire reagenti CRISPR-Cas9 per completare il processo di editing del genoma nell'embrione a 2 cellule.

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CRISPR-Cas9Genome EditingRat EmbryosAdeno-associated Virus (AAV)2-cell Embryo ElectroporationHomology Directed RepairKnock-in Rat ModelsDNA Repair TemplateDNA InsertionDNA SubstitutionViral TransductionCRISPR RNP ComplexesElectroporation

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J. Davis, D., McNew, J. F., Walls, J. N., Bethune, C. E., Oswalt, P. S., Bryda, E. C. CRISPR-Cas9 Genome Editing of Rat Embryos using Adeno-Associated Virus (AAV) and 2-Cell Embryo Electroporation. J. Vis. Exp. (205), e66069, doi:10.3791/66069 (2024).

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