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Combinazione di microscopia a compensazione e fluorescenza per visualizzare i cambiamenti nell'espressione genica e le risposte fisiologiche a Plasmodiophora brassicae
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Combining Clearing and Fluorescence Microscopy for Visualising Changes in Gene Expression and Physiological Responses to Plasmodiophora brassicae
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Combinazione di microscopia a compensazione e fluorescenza per visualizzare i cambiamenti nell'espressione genica e le risposte fisiologiche a Plasmodiophora brassicae

DOI:
10.3791/64297-v

•

06:58 min

•

August 05, 2022

•

, , , , , ,
1Integrative Plant Biology Team,Institute of Plant Genetics Polish Academy of Sciences, 2ZMBP-Center for Plant Molecular Biology,University of Tübingen, 3Department of General Botany, Institute of Experimental Biology, Faculty of Biology,Adam Mickiewicz University

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:36Tissue Preparation and Fixation
  • 02:13Tissue Embedding and Sectioning
  • 03:03Vibratome Sectioning and Specimen Clearing
  • 04:03Staining Procedure and Microscopy
  • 04:49Results: Microscopic Analysis of the Biotrophic Interaction and Gene Expression Regulations Between Plasmodiophora brassicae and Arabidopsis Plants
  • 06:06Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Il presente protocollo descrive un metodo ottimizzato per l'osservazione istologica delle galle indotta da Plasmodiophora brassicae. Le sezioni vibratomo degli ipocotili vengono eliminate prima dell'imaging a fluorescenza per studiare il coinvolgimento dei fattori di trascrizione e dei fitormoni durante la progressione della malattia. Questo protocollo supera i limiti di incorporamento della resina, consentendo la visualizzazione nelle piante di proteine fluorescenti.

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Keywords: Plasmodiophora BrassicaeClubrootGene ExpressionFluorescence MicroscopyClearingGallsPhytohormoneLignificationPlant-pathogen InteractionAgarose EmbeddingVibratome Sectioning

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