Journal
/
/
Monstervoorbereiding door 3D-correlatieve gefocuste ionenbundelfrezen voor cryo-elektronentomografie met hoge resolutie
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Sample Preparation by 3D-Correlative Focused Ion Beam Milling for High-Resolution Cryo-Electron Tomography
DOI:

08:20 min

October 25, 2021

, , , ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:36Cryo-Fluorescence Light Microscopy (Cryo-FLM) of Plunge‐Frozen Grids with Cells
  • 01:51Focused Ion Beam (FIB) Milling
  • 05:47Correlative Transmission Electron Microscopy (TEM)
  • 07:02Results: Visualizing the Endocytic Protein Deposit in the Cell with Cryo‐ET
  • 07:38Conclusion

Summary

Automatic Translation

Hier presenteren we een pijplijn voor 3D-correlatieve gerichte ionenbundelfrezen op het begeleiden van de voorbereiding van cellulaire monsters voor cryo-elektronentomografie. De 3D-positie van fluorescerend gelabelde eiwitten van belang wordt eerst bepaald door cryo-fluorescentiemicroscopie en vervolgens gericht op frezen. Het protocol is geschikt voor zoogdieren, gisten en bacteriële cellen.

Related Videos

Read Article