Journal
/
Biochemistry
/
X-Ray Kristallografie om de oligomerische staat overgang van de Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050 studie
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
X-Ray Crystallography to Study the Oligomeric State Transition of the Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

X-Ray Kristallografie om de oligomerische staat overgang van de Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050 studie

DOI:
10.3791/61288-v

•

11:27 min

•

May 13, 2020

•

, , ,
1Laboratory of Microbiology, Department of Molecular Biology,Université Libre de Bruxelles, 2Labiris Institut de Recherche

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:03Activity Assay
  • 02:19Apoenzyme Preparation
  • 03:32Dimer Preparation
  • 04:03Microseeding
  • 05:01X-Ray Diffraction
  • 05:48Indexation
  • 06:50Molecular Replacement
  • 08:04Model Building
  • 09:07Results: Representative Thermotoga Maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050 Oligomeric State Transition
  • 10:50Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Dit protocol is ontwikkeld om de dimer-dodecamer overgang van TmPep1050, een M42 aminopeptidase, op structureel niveau te bestuderen. Het is een eenvoudige pijplijn vanaf eiwitzuivering tot röntgengegevensverwerking. Crystallogenesis, data set indexatie, en moleculaire vervanging zijn benadrukt door middel van een geval van studie, TmPep1050H60A H307A variant.

Tags

X-ray CrystallographyOligomeric StateThermotoga MaritimaAminopeptidaseTmPep1050Activity AssayApoenzyme PreparationDialysisUltrafiltration

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Voorbereiding en Levering van Protein Microcrystals in lipidische Cubic fase voor Serial Femtoseconde Kristallografie

Het combineren van röntgendiffractie met kleine hoek X-Ray Scattering model ongestructureerde regio's van de Nsa1 van S. Cerevisiae

Karakterisering van glycoproteïnen met de vouw van de immunoglobuline door middel van röntgendiffractie en biofysische technieken

Kleinschalige colorimetrische testen van intracellulaire lactaat en pyruvaat in de Nematode Caenorhabditis elegans

Structurele Studies van macromoleculen in oplossing met behulp van kleine Angle X-Ray Scattering

Een alles-in-een monsterhouder voor macromoleculaire X-Ray kristallografie met minimale achtergrond verstrooiing

Celkweek op siliciumnitride membranen en Cryopreparation voor Synchrotron X-Ray fluorescentie nano-analyse

Screening voor Thermotoga maritima -membraan afhankelijke Pyrofosfatase remmers

Optimaliseren van de groei van endothiapepsine kristallen voor seriële kristallografie experimenten

De geautomatiseerde kristallografiepijpleidingen in de EMBL HTX-faciliteit in Grenoble

Read Article