Journal
/
Chemistry
/
NMR-based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases
JoVE Journal
Chemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Chemistry
NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

NMR-based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases

DOI:
10.3791/59928-v

•

10:24 min

•

June 30, 2019

•

, , , , , , , , , , ,
1Department of Chemistry,Adelphi University, 2Department of Chemistry,Washington University in St. Louis, 3Department of Chemistry,Boston University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:59Initial Test Compound Assay
  • 05:01Detergent Counter Screen Assay
  • 06:19Jump-Dilution Counter Screen Assays
  • 07:56Results: Representative Nuclear Magnetic Resonance (NMR)-Based Assay Results
  • 09:28Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

NMR-basierte Aktivitätsassays wurden entwickelt, um Inhibitoren von zwei Nukleosid-Ribohydrolase-Enzymen zu identifizieren und zu charakterisieren. Es werden Protokolle für anfängliche zusammengesetzte Assays mit 500 m und 250 M, Dosis-Wirkungs-Assays zur Bestimmung der IC-50-Werte, Waschmittel-Gegensieb-Assays, Jump-Dilution-Zähler-Screen-Assays und Assays in E. coli-Vollzellen bereitgestellt.

Tags

NMR-based Activity AssaysEnzyme InhibitionIC50 ValuesArtifact DetectionWhole-cell ActivityNucleoside RibohydrolasesFragment ScreeningTrichomonas VaginalisAnti-trichomonal DrugsReagent VolumesReaction ComponentsSubstrate PreparationTest Compound PreparationReaction Stock SolutionReaction InitiationReaction Quenching

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Steady-State-, Pre-Steady-State-und Einzel-Umsatz Kinetic Measurement für DNA Glycosylase Aktivität

Bestimmung der eisbindenden Ebenen von Frostschutzproteinen durch Fluoreszenzbasierte Eisebene Affinität

Nucleosidtriphosphaten - von der Synthese zur biochemischen Charakterisierung

Fluoreszenz-basierte Überwachung von PAD4 Aktivität über eine Pro-Fluoreszenz Substratanalogon

Ein Farbtest, die speziell Maßnahmen Granzyme B Proteolytische Aktivität: Hydrolyse von Boc-Ala-Ala-Asp-S-Bzl

Deacetylierung Assays zu entwirren, das Zusammenspiel zwischen Sirtuine (SIRT2) und spezifische Protein-Substrate

Charakterisierung, Quantifizierung und substanzspezifische Isotopenanalyse von Pyrogene Kohle Benzolpolycarbonsäuren (BPCA)

HPLC-basierten Assay extrazelluläre Nucleotid / Nukleosid Metabolismus in menschlichen chronischer lymphatischer Leukämie-Zellen zu überwachen

Palladium<em> N.</em> -Heterocyclische Carbenkomplexe: Synthese aus Benzimidazoliumsalzen und katalytische Aktivität bei Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindungs-bildenden Reaktionen

Gleichzeitige Messung von HDAC1 und HDAC6 Tätigkeit in HeLa-Zellen mit UHPLC-MS

Read Article