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Lentiviral mediato gene silenziamento in pseudoislet umano preparato in piastre a basso attaccamento
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Lentiviral Mediated Gene Silencing in Human Pseudoislet Prepared in Low Attachment Plates
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Lentiviral mediato gene silenziamento in pseudoislet umano preparato in piastre a basso attaccamento

italiano

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11:24 min

•

May 14, 2019

DOI:

10.3791/59578-v

DOI:
10.3791/59578-v

•

11:24 min
May 14, 2019

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1Department of Internal Medicine, Carver College of Medicine,University of Iowa, 2Fraternal Order of Eagles Diabetes Research Center,University of Iowa, 3Roy J. Carver Department of Biomedical Engineering,University of Iowa

Summary

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Viene presentato un protocollo per creare pseudoislets umani modificati in gene da cellule di isole umane disperse che vengono tradusse da lentivirus che trasportano RNA a forcina corta (shRNA). Questo protocollo utilizza vasi enzimatici e di coltura prontamente disponibili, può essere eseguito facilmente e produce pseudoislets umani geneticamente modificati adatti per studi funzionali e morfologici.

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LentiviralGene SilencingHuman PseudoisletLow Attachment PlatesIslet FunctionGene Expression ModulationSHR8 TransductionProteolytic EnzymeCollagenolytic EnzymeCell DissociationCMRL MediumFetal Bovine Serum

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Liu, S., Harata, M., Promes, J. A., Burand, A. J., Ankrum, J. A., Imai, Y. Lentiviral Mediated Gene Silencing in Human Pseudoislet Prepared in Low Attachment Plates. J. Vis. Exp. (147), e59578, doi:10.3791/59578 (2019).

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