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Baseados em CRISPR-Cas9 genoma engenharia para gerar modelos Jurkat repórter para a infecção de HIV-1 com Sites selecionados Proviral integração
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JoVE Journal Immunology and Infection
CRISPR-Cas9-based Genome Engineering to Generate Jurkat Reporter Models for HIV-1 Infection with Selected Proviral Integration Sites

Baseados em CRISPR-Cas9 genoma engenharia para gerar modelos Jurkat repórter para a infecção de HIV-1 com Sites selecionados Proviral integração

português

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14:27 min

•

November 14, 2018

DOI:

10.3791/58572-v

DOI:
10.3791/58572-v

•

14:27 min
November 14, 2018

•

3 Views
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1Heinrich Pette Institute,Leibniz Institute for Experimental Virology, 2Department of Anesthesiology,University Medical Center Hamburg-Eppendorf, 3German Center for Infection Research (DZIF)

Summary

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Nós apresentamos um fluxo de trabalho de engenharia do genoma para a geração de novos modelos in vitro para a infecção de HIV-1 que recapitular integração proviral em locais seleccionados genômicas. Segmentação dos repórteres HIV-derivado é facilitada pela manipulação de genoma CRISPR-Cas9-mediada, site-specific. Protocolos detalhados para geração de clone de célula única, triagem e verificação de direcionamento correta são fornecidos.

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CRISPR-Cas9Genome EngineeringJurkat Reporter ModelsHIV-1 InfectionProviral Integration SitesGene ExpressionIn-vitro ModelsGuide RNA DesignNCBI BLASTHomology ArmsJurkat T-cell Transfection

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Bialek, J. K., Walther, T., Hauber, J., Lange, U. C. CRISPR-Cas9-based Genome Engineering to Generate Jurkat Reporter Models for HIV-1 Infection with Selected Proviral Integration Sites. J. Vis. Exp. (141), e58572, doi:10.3791/58572 (2018).

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