Journal
/
Biology
/
Inductibles stables lignées cellulaires LAP marqués pour Enquêter la fonction des protéines, Spatiotemporal Localisation et Interaction Networks Protein
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Inducible LAP-tagged Stable Cell Lines for Investigating Protein Function, Spatiotemporal Localization and Protein Interaction Networks
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Inductibles stables lignées cellulaires LAP marqués pour Enquêter la fonction des protéines, Spatiotemporal Localisation et Interaction Networks Protein

DOI:
10.3791/54870-v

•

11:04 min

•

December 24, 2016

•

, , , ,
1Department of Chemistry and Biochemistry,University of California, Los Angeles, 2Molecular Biology Institute,University of California, Los Angeles, 3Jonsson Comprehensive Cancer Center,University of California, Los Angeles

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:44Generation of an Inducible Stable Cell Line that Expresses the LAP-tagged Gene of Interest
  • 02:06Purification of LAP-tagged Protein Complexes
  • 08:10Identify Interacting Proteins by Mass Spectrometry Analysis
  • 09:12Results: Evaluation of a LAP-Tau HEK293 Inducible Cell Line
  • 10:32Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

We describe a method for generating localization and affinity purification (LAP)-tagged inducible stable cell lines for investigating protein function, spatiotemporal subcellular localization and protein-protein interaction networks.

Tags

Inducible LAP-taggedStable Cell LinesProtein FunctionSpatiotemporal LocalizationProtein Interaction NetworksHEK293 CellsHygromycin SelectionTandem Affinity Purification (TAP)Tet/Dox InductionAnti-GFP AntibodyProtein A Beads

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Coloration des protéines dans les gels de Coomassie G-250, sans solvant et l'acide acétique organique

Utiliser le système de fractionnement GELFREE 8100 pour les Poids Moléculaire à base de fractionnement avec récupération de la phase liquide

Bimoléculaire complémentation de fluorescence (BiFC) Dosage pour les interactions protéine-protéine dans les cellules d'oignon Utilisation du pistolet à gènes Helios

Génération de lignées stables de cellules humaines avec inductible par la tétracycline (Tet-on) shRNA ou expression d'ADNc

Étudier les interactions protéine-protéine dans les cellules vivantes en utilisant le transfert d'énergie de résonance de bioluminescence

Découvrir interactions des protéines et caractérisation de protéines de fonction utilisant la technologie HaloTag

Identifier les sites d'interaction protéine-protéine à l'aide de peptides tableaux

Green Fluorescent Protein base Expression dépistage des protéines membranaires dans<em> Escherichia coli</em

Selected Reaction Monitoring spectrométrie de masse pour Absolute quantification des protéines

Analyse de l’imagerie de la complémentation de luciférase dans les feuilles de Nicotiana benthamiana pour transitoirement déterminant la dynamique Interaction protéine-protéine

Read Article