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Perfiles de microARN de alto rendimiento: Multiplex Optimizado QRT-PCR en la escala de nanolitros de la IFC Fluidigm dinámica ArrayTM
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August 03, 2011
DOI:
1The Eli and Edythe Broad Center of Regeneration Medicine and Stem Cell Research,University of California San Francisco , 2Center for Reproductive Sciences,University of California San Francisco , 3Department of Urology,University of California San Francisco , 4Department of Cell and Tissue Biology,University of California San Francisco , 5Fluidigm Corporation,Fluidigm Corporation , 6Department of Obstetrics and Gynecology,Hadassah-Hebrew University Medical Center, 7UCSF – Helen Diller Family Comprehensive Cancer Center,University of California San Francisco
Summary
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A continuación se describe un reverso transcriptasa optimizado multiplex PCR cuantitativa (QRT-PCR) en combinación con el protocolo de una plataforma de microfluidos como un costo y el tiempo efectivo instrumento de cribado de alto rendimiento para los microRNA (miRNA) los niveles de expresión, especialmente cuando se trabaja con cantidades limitadas de muestras.
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High Throughput MicroRNA ProfilingMultiplex QRT-PCRFluidigm Dynamic ArrayTM IFCsMiRNAsQuantificationMicroRNA LevelsWild-typeSmall RNA Deficient Mouse Embryonic Stem Cells (mESC)AccuracyRobustnessOptimized MethodPurifying PrimersSingleplex Real-time DetectionMicrofluidic ChipNanoliter VolumesReagent CostsHigh Throughput MiRNA Expression Profiling
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Moltzahn, F., Hunkapiller, N., Mir, A. A., Imbar, T., Blelloch, R. High Throughput MicroRNA Profiling: Optimized Multiplex qRT-PCR at Nanoliter Scale on the Fluidigm Dynamic ArrayTM IFCs. J. Vis. Exp. (54), e2552, doi:10.3791/2552 (2011).
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