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Mutagênese e Funcional Protocolos de Seleção para a Evolução Dirigida de proteínas em E. coli</em
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Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli

Mutagênese e Funcional Protocolos de Seleção para a Evolução Dirigida de proteínas em E. coli</em

português

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09:01 min

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March 16, 2011

DOI:

10.3791/2505-v

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10.3791/2505-v

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March 16, 2011

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1Department of Microbiology & Environmental Toxicology,University of California Santa Cruz – UCSC

Summary

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Aqui demonstramos um protocolo simples para criar uma biblioteca aleatória mutante para uma seqüência alvo. Nós mostramos como esse método, que é realizado in vivo em Escherichia coli, pode ser acoplado com seleções funcional para evoluir novas atividades enzimáticas.

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MutagenesisFunctional SelectionDirected EvolutionProteinsE. ColiMutant LibrariesColE1 PlasmidDNA Polymerase IMutator StrainSolid MediaMutation FrequencyLabelingPCRCloningSequence Space ExplorationBiochemical Activities

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Troll, C., Alexander, D., Allen, J., Marquette, J., Camps, M. Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli. J. Vis. Exp. (49), e2505, doi:10.3791/2505 (2011).

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