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内タンパク質の定方向進化のための変異導入と機能選択プロトコル E.大腸菌</em
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Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli
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内タンパク質の定方向進化のための変異導入と機能選択プロトコル E.大腸菌</em

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09:01 min

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March 16, 2011

DOI:

10.3791/2505-v

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10.3791/2505-v

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09:01 min
March 16, 2011

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1Department of Microbiology & Environmental Toxicology,University of California Santa Cruz – UCSC

Summary

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ここでは、特定の標的配列のランダム変異体ライブラリーを作成する単純なプロトコルを示しています。我々は、大腸菌の中で、生体内で行われるこの方法は、、新たな酵素活性を進化させ、機能の選択と結合することができる方法を示します。

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MutagenesisFunctional SelectionDirected EvolutionProteinsE. ColiMutant LibrariesColE1 PlasmidDNA Polymerase IMutator StrainSolid MediaMutation FrequencyLabelingPCRCloningSequence Space ExplorationBiochemical Activities

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Troll, C., Alexander, D., Allen, J., Marquette, J., Camps, M. Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli. J. Vis. Exp. (49), e2505, doi:10.3791/2505 (2011).

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