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Microscopia Confocal para medir três modos de dinâmica de poros de fusão em células adrenal chromaffin
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Nörobilim
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JoVE Journal Nörobilim
Confocal Microscopy to Measure Three Modes of Fusion Pore Dynamics in Adrenal Chromaffin Cells

Microscopia Confocal para medir três modos de dinâmica de poros de fusão em células adrenal chromaffin

DOI:

12:30 min

March 16, 2022

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Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 01:07Bovine Chromaffin Cell Culture
  • 02:52Transfection with Electroporation
  • 04:18Preparation for Patch-Clamp Recording and Confocal Imaging
  • 05:41Patch-Clamp Recording and Confocal Imaging
  • 09:01Confocal Imaging Data Analysis
  • 10:21Results: Whole-Cell Voltage-Clamp Recordings and Visualization of Fusion Events Under Confocal Microscope
  • 11:52Conclusion

Özet

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Este protocolo descreve uma técnica de imagem confocal para detectar três modos de fusão em células adrenals de chromaffin bovinas. Esses modos de fusão incluem 1) close-fusion (também chamado de kiss-and-run), envolvendo abertura e fechamento de poros de fusão, 2) stay-fusion, envolvendo abertura de poros de fusão e manutenção do poro aberto, e 3) redução de fusão, envolvendo encolhimento vesícula fundido.

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